秋季建-色谱概论.ppt

mixture Purpose Analysis Preparation Mathematically: chemometrics Physically: extraction, chromatography, fractionation, … Chemically: tandem MS, … 色谱与中药研究 中药现代化－中药质量控制 中药指纹图谱 中药材化学成分提取分离 中药材资源及品质鉴定研究 中成药及中药材有效成份的定量分析 药效、药代动力学、代谢组学 课程概况 理论课：36学时 常用的分离方式 提取 蒸馏 离心 过滤 ? ? ? ? 色谱法概论 百年历史回顾 基本内容 发展趋势 色谱法的主要应用 药学研究：药物质量控制、手性药物分离、化学单体制备…… 食品检测：孔雀石绿、瘦肉精、三聚氰胺…… 刑侦法医：中毒分析，毒品筛查，兴奋剂检测…… 农业应用：农药残留…… 吸附色谱法 分离原理 利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力的差别而实现分离。 吸附过程是试样中组分的分子(X)与流动相分子(Y)争夺吸附剂表面活性中心的过程，即为竞争吸附过程 。 分配色谱法 分离原理 利用被分离组分在固定相或流动相中的溶解度差别而实现分离。 离子交换色谱法 分离原理 利用被分离组分离子交换能力的差别而实现分离。 分为阳离子交换色谱法和阴离子交换色谱法。 分子排阻色谱法 分离原理　根据被分离组分分子的线团尺寸进行分离。也称为空间排阻色谱法。 渗透系数： Kp =?Xs?/?Xm? 　（0＜Kp＜1 ） 　　由溶质分子的线团尺寸和凝胶孔隙的大小所决定。在一定分子线团尺寸范围内，Kp与分子量相关，即组分按分子量的大小分离。 塔板理论 始于马丁（Martin）和辛格（Synge）提出的塔板模型。 分馏塔：在塔板上多次气液平衡，按沸点不同而分离。 色谱柱：组分在两相间的多次分配平衡，按分配系数不同而分离。 速率理论(Van Deemter方程) 1956年，荷兰学者范第姆特(Van Deemter)提出了色谱过程动力学理论——速率理论。 常用的定量方法 峰面积百分比法 常用于有关物质的测定 外标法 在液相色谱中用的最多 内标法 准确，但是麻烦 在气相色谱中用的最多 外标法定量 配制一系列已知浓度的标样 外标法定量 实际色谱图 内标法定量（一） 配制一系列浓度的标样，其中加有内标样 内标法定量（二） 色谱法的发展 生物色谱法 中药色谱指纹图谱 生物色谱法(Biochromatography) 80年代中后期，生命科学与色谱分离技术交叉 将活性生物大分子、活性细胞膜、甚至活细胞固着于色谱担体上，作为一种生物活性填料，用于液相色谱法，形成一种能够模仿药物与生物大分子、靶体或细胞相互作用的色谱系统，表征药物与生物大分子、靶体间的相互作用。 中科院大连化学物理研究所 邹汉法、西安交通大学 贺浪冲、南京中医药大学国家规范化中药药理实验室 ?对于中药等成分复杂的研究对象，生物色谱法由于固定相能够特异性、选择性地与活性成分结合，可以排除大量非作用杂质成分的干扰，是研究中药等复杂对象的有效手段。 分子生物色谱法 (Molecular Biochromatography) 仿生物膜色谱法 (Artificial Biomembrane Chromatography) 生物膜色谱法 (Biomembrane chromatography) 细胞生物色谱法(Cell Biochromatography) 脂质体柱 五味子提取物在脂质体柱上的分离 全二维色谱分离五味子提取物 中药指纹图谱 技术水平较低，现代技术应用少。 参差不齐，许多十几年未变。 中药质量标准无法说明发挥药效的化学成分的数量和含量，也无法保证每批中药的成分一致性（稳定性），国际未接受。 体系存在缺陷，无法被国际认可,亟待提高和发展 一、背景——中医药特色与优势 为中华民族的繁衍作出了巨大的作用。 公共卫生资源充分发挥作用；在国家初级保健系统中的重要地位。 降低了疾病发生率，提高了公众的生命质量，特别是在治疗慢性病、养生保健等有优势。 新药研发费用远较化学合成药物为低。 传统中药的不足 研究开发体系不完善 生产不规范和规模小 国内外认可程度不高 中药现代化的关键问题 理念: 将传统中药的优势特色与现代科学技术相结合，按照国际规范进行研究、开发、生产、管理和使用。 原则：保持中医药优势特色；与现代科学技术充分结合；具备国际认可的标准规范。 核心: 保证中药质量的稳定和可控，提升中药药