离子交换色谱原理介绍和实际操作.PDFVIP

活性蛋白整体方案 Active Protein Solutions 离子交换色谱的原理介绍和实际操作 离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法 ，其原理是指 被分离物质所带的电荷可与离子交换剂所带的相反电荷结合 ，这种 带电分子与固定相之间的结合作用是可逆的 ，在改变 pH或者用逐 渐增加离子强度的缓冲液洗脱时 ，离子交换剂上结合的物质可与洗 脱液中的离子发生交换而被洗脱到溶液中。由于不同物质的电荷不 同 ，其与离子交换剂的结合能力也不同 ，所以被洗脱到溶液中的顺 序也不同 ，从而被分离出来。 离子交换剂是由不溶于水的网状结构高分子聚合物骨架构成 ，骨架 上有许多共价结合的带电基团 ，如果侧链是带正电基团 ，就可与带 负离子相结合 ，称为阴离子交换剂 ，吸附带负电蛋白质。如果侧链是带负电的基团 ，则称为阳离子交换剂。强离子 交换树脂在宽 pH范围内保持离子化 ，而弱离子交换树脂只在窄 pH值内离子化。 类型