实验四病源性球菌杆菌xiugai.ppt

病源性球菌与杆菌 一、实验目的 1.掌握链球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌、白喉杆菌的形态特征和染色特性。 2.熟悉肠道杆菌培养特征、生化反应及动力学等特性。 3.了解三种葡萄球菌产生的色素。 4.了解乙型溶血型链球菌在血琼脂平板上的菌落特点及溶血性。 5熟悉抗“o”试验的方法及临床意义。 二、实验内容 1.自己动手观察链球菌、脑膜炎双球菌的形态;示教观察结核杆菌、白喉杆菌的形态。 2.观察肠道杆菌的双糖发酵，鉴别培养基（ss培养基）的生化反应。 3.化脓性球菌的鉴定 ⑴三种葡萄球菌的色素观察 ⑵乙型链球菌的溶血现象观察 ⑶抗“O”实验。 三、作业： 1.镜下绘出4种形态图 2.根据生化特性及产生色素，葡萄球菌分为哪几种类型？ 结核分枝杆菌 抗酸染色 乙型溶血性链球菌 溶血环 白喉棒状杆菌 异染颗粒 肠道致病菌（SS培养基） * * ＿ ﹢ ﹢ — — 结果 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 2%兔RBC 0.25ml 0.25ml 0.25ml 0.25ml 溶血素“O”(Ag) 0.25ml 0.25ml 缓冲液 1:750血清0.25ml 1:500血清0.25ml 1：250血清0.25ml 血清（Ab） 5 4 3 2 1 管号 加入物 Salmonella -Shigella Mediun 主要成分 基础营养 乳糖 指示剂 抑制剂 分解乳糖 不分解乳糖 产酸 PH 指示剂变红色 红色大菌落 大肠杆菌等 无明显变化 无色半透明小菌落 志贺菌等 大肠杆菌 痢疾杆菌 实验四 病原性球菌 1. 五类病原性球菌的形态、排列及染色性 2. 葡萄球菌、链球菌的培养物 3. 血浆凝固酶试验--玻片法 试管法 4、抗链球菌溶血素”O”（ASO）乳胶试验 5、脓汁中葡萄球菌的分离鉴定 示教 （操作，1人/组） 示教 示教 示教 （操作，1人/组） 肺炎球菌特殊染色可见的荚膜 G+球菌： 金葡菌 链球菌 肺炎双球菌 1. 五类病原性球菌的形态、排列及染色性 示教 G-球菌： 淋球菌 脑膜炎球菌 2. 葡萄球菌、链球菌的培养物 示教 普通琼脂平板 血平板 菌落形状 色素 溶血性 金葡 圆形凸起光滑中等大小 金黄色 + 柠葡 同上 柠檬色 - 白葡 同上 白色 - 表1 血平板 甲型链球菌 针尖小菌落、草绿色狭窄溶血环 乙型链球菌 针尖小菌落、透明宽大溶血环 巧克力血平板 脑膜炎双球菌 菌落透明似露滴状 表2 表3 3. 血浆凝固酶试验--玻片法 （操作，1人/组） 原理： 方法： 兔血浆 兔血浆 生理盐水 1 2 3 金葡 白葡 金葡 + + + 凝集（+） 不凝集（-） 不凝集（-） 4、血浆凝固酶试验（试管法） 金葡菌 白葡菌 + + 兔血浆 兔血浆 37℃30′水浴观察 凝集为阳性 不凝集为阴性 示教 凝固酶实验（试管法） 五、抗链球菌溶血素“O”（ASO） 快速胶乳法 高滴度病人血清被适量溶血素中和了正常水平 的抗体后，还有多余ASO，这些多余抗体即与SLO胶乳 试剂反应，出现清晰、均匀的凝集颗粒。 （操作，1人/组） 原理： 阳性对照 阴性对照 待测血清 各加溶血素“O” 1滴轻摇1min 再加SLO胶乳1滴轻摇3min 观察结果 方法： 稀释度 ASO （IU/ml） 1：15 400 1：30 800 1：60 1600 ASO≤250 IU/ml 阴性