XPD对肝癌HepG2增殖及REDD1基因表达的影响-医学专业论文.docxVIP

摘要 摘要 万方数据 万方数据 摘 要 目的：探讨人着色干皮病基因 D(xeroderma pigmentosum D，XPD)对人肝癌 细胞 HepG2 增殖凋亡及 REDD1 基因表达的影响。 方法：实验将重组质粒 pEGFP-N2/XPD 及空载质粒 pEGFP-N2 通过脂质体 （Lipofectamine?2000）介导的瞬时转染方式转入人肝癌细胞HepG2中。实验 分为 4 组，分别为空白组、脂质体组、pEGFP-N2 组、pEGFP-N2/XPD 组。以 基因 绿色荧光 蛋白在荧光 显微镜表 达观察 转染情况 ；逆 转录聚合 酶链反应 (RT-PCR)、蛋白印迹（Western blot）法测细胞中 XPD、REDD1 基因的 mRNA、 蛋白质的表达水平；流式细胞仪测细胞凋亡变化；MTT 法测细胞增殖。 结 果： 荧 光显 微镜 观察 到转 染了 重 组质 粒 pEGFP-N2/XPD 及 空载 质粒 pEGFP-N2 的细胞绿色荧光，表明转染成功。RT-PCR 及 Western blot 结果显示： 与其他 3 组相比较，XPD 组中 XPD、REDD1 的 mRNA 及蛋白表达量明显升高 （均 P 0.01）。MTT 法结果示 XPD 组较其他 3 组细胞增殖活性显著降低（均 P 0.01）。流式细胞仪结果示 XPD 组细胞凋亡率明显升高达到 45%