水稻渗透胁迫抑制表达基因克隆与表达分析.docVIP

水稻渗透胁迫抑制表达基因克隆与表达分析 　　摘要通过基因芯片技术，鉴定了一个PEG6000胁迫抑制表达基因。该基因编码MYB转录因子，命名为OsSRMYB1。荧光定量PCR研究结果表明，该基因的表达显著受PEG6000抑制，受氧化胁迫诱导，而低温和ABA处理下该基因的表达未发生显著变化。组织表达分析结果表明，OsSRMYB1基因在水稻不同组织中均有表达，在叶中表达量较高。在不同生长阶段的穗中，OsSRMYB1基因在发育中的穗中表达较高，在成熟穗和幼穗中表达量较低。本研究为进一步深入分析OsSRMYB1的生物学功能提供参考。 　　关键词MYB；水稻；渗透胁迫；穗发育；转录因子 　　中图分类号S511文献标识码A文章编号 1007-5739（2014）11-0009-03 　　 　　Cloning and Expression Analysis of a Osmotic Stress Repressive Gene in Rice 　　YE Zi-cheng 　　（College of Agriculture，Nanjing Agricultural University，Nanjing Jiangsu 210095） 　　AbstractA gene encoding MYB transcription factor was identified as a PEG6000-repressive gene by microarray，designated OsSRMYB1.Real-time RT-PCR assay suggested that expression of OsSRMYB1 was significantly repressed by PEG6000，while not markedly changed upon ABA or cold stress. OsSRMYB1 expression existed in the different tissues of rice and the expression was the highest in leaves. The tissue-specific expression of OsSRMYB1 indicated that it was highly expressed in the developing panicles. This study provide reference for the depth analysis of the biological functional of OsSRMYB1. 　　Key wordsMYB；rice；osmotic stress；panicle development；transcription factor 　　 　　植物对非生物胁迫的适应依赖于一系列信号级联反应的激活，包括胁迫信号的感知、信号转导、胁迫相关基因的表达及胁迫相关代谢物的积累，从而对损伤进行修复，进而对细胞的稳态进行重建。对胁迫相关基因编码产物的类型和作用进行分类，主要有以下2种：一类是直接保护细胞免受逆境胁迫的功能蛋白，如LEA蛋白、抗冻蛋白、离子信道蛋白以及渗透调节因子；另外一类是一种调控蛋白，其可参与到胁迫信号的传导和基因表达调节的过程中，包括转录因子、蛋白激酶等。已有研究表明，bZIP类、AP2/EREBP类、锌指蛋白、MYB/MYC类等多种类型的转录因子参与到植物的非生物胁迫应答中。MYB类转录因子包含MYB结构域，此结构域最早是在脊椎动物原癌基因v-Myb编码产物的DNA结合域中被发现[1]。YB转录因子一般定位于细胞核中，紧密地与核基质和染色质相连[2]。 　　根据MYB类转录因子所含有的MYB结构域的数目，可被简单地分成3个亚类[3]：一是只含1个MYB结构的MYB蛋白亚类成员，二是含有2个MYB结构域的R2R3亚类成员，三是含有3个MYB结构域的R1R2R3亚类成员。以前有相关的研究表明，MYB类转录因子广泛地在植物的各种反应中发生作用，包括细胞形态发生、次生代谢等。蔡新忠等[4]的研究结果证明MYB基因在番茄的抗旱中发挥一定的作用。Urao等[5]从拟南芥中分离出1个MYB基因Atmyb2，该基因的表达受到干旱、高盐以及ABA等的诱导，体外EMSA表明Atmyb2蛋白能够与MYB识别位点TAACTG进行特异性的结合。Abe等在分析一个足以响应干旱和ABA诱导的来源于rd22基因启动子的67 bp DNA序列时，鉴定了2个顺式作用元件，即MYC和MYB识别位点。瞬时表达分析表明Atmyb2能够促进rd22启动子驱动的报告基因的表达。Dene Kamp等[6]对拟南芥中MYB类转录因子AtMyb102的