ZnO和TiO2纳米颗粒对锦鲤超氧化物歧化酶同工酶的影响研究-生物医学工程专业论文.docxVIP

摘要 摘要 I I 摘 要 本文以锦鲤为受试生物采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究ZnO（20nm和 100nm）和 TiO2 纳米颗粒（10 nm和 30nm）对锦鲤心脏、肝脏、鳃、肾脏、脑、肌肉等六种不同 组织超氧化物歧化酶同工酶（SOD）活性的影响，同时进行了形态学上的观察，为纳米 颗粒的安全性及纳米颗粒对水生生物的毒理效应提供理论支持。本论文得出结论如下： （1）凝胶电泳结果表明 SOD 是二聚体酶，按迁移率分为 mSOD 和 sSOD。两种。 锦鲤组织中 SOD 共分离出四条酶带。不同组织中的 SOD 表现出酶带数和表达量的差异， 其中六种组织都表达出一条主酶带 mSOD2，酶带的颜色深浅和粗细存在组织差异，且 肝脏、肾脏、鳃都还表达出另一条酶带 mSOD1，肌肉组织还表达出两条特征带 sSOD1 和 sSOD2。锦鲤各器官中表达出的 SOD 同工酶组织特异性明显。 （2）ZnO 纳米颗粒浓度、粒径对锦鲤心脏、肝脏、鳃、肾脏、脑、肌肉等六种组 织 SOD 活性均有明显的影响。在浓度效应方面，SOD 整体呈现低浓度诱导表达高浓度 抑制表达，当 ZnO 纳米颗粒浓度达到 30-60mg/L 时，各组织 SOD 的表达量最多，高浓 度表达减少，当纳米颗粒浓度达 150mg/L 时，除了脑组织以外其他五种组织 SOD 表达 量都少于对照组；在粒径效应方面，体现为粒径越小，各组织的酶带活性变化越大，甚 至出现反复的情况，耐性差。呈现出明显的浓度-效应关系和粒径-效应关系。 （3）TiO2 纳米颗粒浓度、粒径对锦鲤心脏、肝脏、鳃、肾脏、脑、肌肉等六种组 织的SOD表达表现明显氧化胁迫效应。在浓度效应方面，呈现低浓度诱导表达高浓度表 达量减少，甚至有些降低到对照组以下抑制表达现象。在粒径效应方面，小粒径的TiO2 纳米颗粒毒性效应更大，在 10nmTiO2纳米颗粒处理组，六种组织SOD表达量减少明显， 甚至锦鲤的脑组织的酶带表达量都有变化，说明较小的粒径可以穿过血脑屏障损伤脑组 织。锦鲤肾脏组织对TiO2纳米颗粒较敏感，表达量增加，且有表达量反复的明显氧化应 激现象。 （4）通过形态学观察发现，ZnO、TiO2纳米颗粒短时间作用，锦鲤出现全身的鳞片 竖立现象，鱼体出现变黑等病症。当锦鲤在ZnO纳米颗粒悬浊液中生活一个月，死亡率较 高。存活的锦鲤，表现出浑身倒鳞、浮肿、充血、眼睛突出、行动缓慢、呆滞等现象。 对TiO2纳米颗粒悬浊液中处理较长时间的锦鲤进行解剖学的观察，发现纳米颗粒凝结在 一起并附着在鳃上，影响锦鲤的呼吸。锦鲤可以吸收代谢少量的纳米颗粒，过量的纳米 颗粒堵塞锦鲤肠道。 关 键 词 ： ZnO 纳米 颗粒； TiO2 纳米颗粒；锦鲤；生物效应； SOD Ab Abstract II II Abstract In this paper the fancy carp was choosed as subjects to study the influence of ZnO and TiO2 nanoparticles on the expression of Superoxide dismutase (SOD) Isozymes in various tissues of fancy carp by means of Polypropylene-amide erect-board electrophoresis and the morphology observation.The conclusion was as followed: (1) Gel electrophoresis results showed that the SOD was a two dimer enzyme according to the mobility of divided into mSOD and sSOD.Fancy carp tissues of SOD were extracted four enzyme bands.SOD in different tissues showed the changes of the numbers of enzyme bands and expression, the six tissues all expressed a main enzyme band mSOD2, enzyme band group differences in color depth and thickness, and the liver, kidney, gill had expressed another band mSOD1, muscle tissue expressed other two features ban