生物工艺学试验讲义-长春工业大学.DOC

PAGE PAGE 10 生物工艺学实验讲义 长春工业大学 化学与生命科学学院 生物工程教研室 2009-4-10 实验一中药大枣的综合提取实验 实验目的：1、掌握中药综合提取设备的工作原理； 2、了解大枣的基本性质及相应提取方法； 实验原理：大枣又名红枣、干枣、枣子，起源于中国，在中国已有四千多年的种植历史，自古以来就被列为“五果”（桃、李、梅、杏、枣）之一。红枣富含蛋白质、脂肪、糖类、胡萝卜素、B族维生素、维生素C、维生素P以及钙、磷、铁和环磷酸腺苷等营养成分。其中维生素C的含量在果品中名列前茅，有维生素王之美称。据国外的一项临床研究显示：连续吃大枣的病人，健康恢复比单纯吃维生素药剂快3倍以上。红枣所含有的环磷酸腺苷，是人体细胞能量代谢的必需成分，能够增强肌力、消除疲劳、扩张血管、增加心肌收缩力、改善心肌营养，对防治心血管系统疾病有良好的作用；中医中药理论认为，红枣具有补虚益气、养血安神、健脾和胃等作用，是脾胃虚弱、气血不足、倦怠无力、失眠多梦等患者良好的保健营养品。红枣对慢性肝炎、肝硬化、贫血、过敏性紫癜等病症有较好疗效；红枣含有三萜类化合物及环磷酸腺苷，有较强的抗癌、抗过敏作用。民间甚至有“一天吃仨枣，百岁不显老”之说。我国著名的大枣品种有山东大枣,泗洪大枣，金丝小枣，赞皇大枣,哈密大枣，新郑大枣等。 本次实验对大枣采用常压热回流方法提取，减压浓缩制备浸膏。 常压热回流是指在加热条件下溶媒进入细胞组织中溶解有效成分而成提取液的过程，提取液受热，溶媒变为蒸汽，经冷凝又变成液体，流回提取罐内，再继续浸提有效成分，如此将有效成分提取完全。 减压浓缩是指将回流得到的提取液过滤后，进行减压蒸发法浓缩到所需稠度，减压浓缩具有浓缩效率高、药液受热时间短的优点。 实验用品：1、试剂：水 2、材料：大枣、山楂 3、仪器：多功能提取罐（200升） 实验步骤： 提取：常压热回流水提取 取山楂饮片和大枣，清洗去杂后放入提取罐中，加水适量，进行热回流提取2次，每次2小时，过滤。 浓缩：减压浓缩（-0.06兆帕，70摄氏度） 合并两次提取液，加热浓缩至稠膏（膏；原材料=1：4） 实验结果：测定浓缩膏的比重及重量，计算出膏率。 出膏率=浓缩膏重/药材重量*100% 注意事项： 提取浓缩时打开冷却水阀门，并保证冷却器内冷凝水足量。 工艺选择自动或半自动时，一定先设定温度，并参考。 锅炉每次用完后，必须待锅炉冷却排掉污水以备下次使用。 开关提取罐闸门时，必须目视闸门进行解密封、解锁、开锁操作。 要防止泵空转。 思考题： 说明中药常压热回流提取和减压浓缩的原理。 为什么药物泵不能空转。 为什么提取时需要包煎的物料必须包好再放入罐中。 实验二柱层析法分离黄连中小檗碱与掌叶防己碱 实验目的：1、学习和掌握水溶性生物碱的提取方法； 2、学习和掌握生物碱的柱层析分离方法； 3、学习和掌握生物碱的化学检识。 实验原理：黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y.Chenget Hsiao或云连Coptis teeta Wall.的干燥根茎。有清热燥湿，泻火解毒的功效，是一种重要的中药。 黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱(palmatine)、黄连碱（jatrorrhizine）等。其中小檗碱含量最高，可达10%左右，而且以盐酸盐的状态存在于黄连中，小檗碱有很强的抗菌作用，已被广泛的用于临床；掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。 小檗碱，也叫黄连素，是一种异喹啉生物碱，分子式[C20H18NO4]+，又称黄连素 ，结构见图1。存在于小檗科等4科10属的许多植物中。小檗碱从乙醚 中可析出黄色针状晶体。熔点145℃。溶于水，难溶于苯、乙醚和氯仿。小檗碱为一种季铵生物碱，其盐类在水中的溶解度都比较小，例如盐酸盐为1∶500，硫酸盐为1∶30。小檗碱从水或稀乙醇中析出的晶体带有5.5分子结晶水；若从氯仿、丙酮或苯中结晶，也带有相应的结晶溶剂分子。小檗碱用不同的碱处理，可得到季铵式、醛式和醇式等三种不同形式的小檗碱，其中以季铵式最稳定。小檗碱对溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、淋球菌和弗氏、志贺氏痢疾杆菌均有抗菌作用，并有增强白血球吞噬作用。小檗碱的盐酸盐（俗称盐酸黄连素）已广泛用于治疗胃肠炎、细菌性痢疾等，对肺结核、猩红热、急性扁桃腺炎和呼吸道感染也有一定疗效。 图1小檗碱结构 掌叶防己碱又叫巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇，几乎不溶于氯仿、乙醚等。盐酸掌叶防己碱为黄色针