不同居群的湖北海棠的SSR分析-植物学专业论文.docx

聊城大 聊城大学硕士学位论文 PAGE PAGE 10 摘 要 从 40 对苹果属(Malus Mill.)引物中筛选出 7 对多态性较强的引物，对采自全国多 个居群的湖北海棠(Malus hupehensis(Pamp.)Rehd.)、山荆子、三叶海棠及丽江山荆子 的 85 份材料进行了遗传多样性分析和种质亲缘关系的鉴定，以揭示不同居群的湖北 海棠的遗传多样性，以及湖北海棠与相近种的亲缘关系，从而为研究湖北海棠不同居 群的遗传结构和遗传多样性及种质鉴定和起源演化等提供分子水平上的资料。 本研究所用材料均由野外采集所得，包括山东、吉林、河北、山西、湖南、安徽、 云南、浙江 8 个省区。其中山荆子、三叶海棠被作为外群进行对照。主要研究成果如 下： .总结出了适合提取湖北海棠等含糖和多酚类物质较多植物的基因组 DNA 的方 法，表明经本方法提出的叶片基因组 DNA 纯度较高。 .认为经过硅胶快速干燥后的叶片提取的 DNA 量较大，仅次于新鲜样品，高于 腊叶标本上的干叶，适用于 DNA 分析。 3.7 对 SSR 引物共扩增出 84 个多态性位点。平均每个引物检测到 12 个多态性位 点，平均多态性为 97.8％，平均杂合度为 0.73，表明不同居群的湖北海棠之间存在 较高水平的遗传多样性。 4.用 NTSYS 软件进行聚类分析表明，产于河北和山西省的山荆子具有较高的遗 传相似性，产于天目山、黄山的湖北海棠与产于云南的丽江山荆子及三叶海棠有较密 切的关系；但产于山东的湖北海棠却与山荆子关系更密切。这说明三叶海棠、丽江山 荆子、山荆子三个均有可能是湖北海棠的杂交亲本，不同产地的湖北海棠可能有不同 的起源。 中文关键词：湖北海棠；居群；SSR；遗传多样性 分类号：Q949.751.8 Abstract SSR genetic diversity analysis of Malus hupehensis (Pamp.) Rehd. accessions which were collected from different populations of China from North to Southwest was carried using 7 SSR markers which was developed and screened from 40 Malus markers. The Malus species (M. baccata (L.) Borckh.), M. rockii Rehd. and M. toringo De Vriese (formerly M. sieboldii Rehd.) were also involved in this analysis in order to provide molecular level evidences for germplasm collection, maintenance, and the origin and evolution researches of M. hupehensis (Pamp.) Rehd. and also the hybrid origin in Malus. The 85 accessions herein come from Dr. Qian’s collecting from Shandong province, Shanxi province, Jilin province, Zhejiang province, Yunnan province, Hebei province, Anhui and Hunan province. Results of SSR analysis showed: Based on M. hupehensis (Pamp.) Rehd. var. mengshanensis G. Z. Qian, a new method in isolating of genomic DNA was resulted from the typical CTAB method. More DNA was collected by the means of new isolationg method. The total amount genetic DNA isolated from leaves dried by Silica were bigger than leaves of specimens. Among the 3 DNA material, fresh materials were pointed out as the best for DNA isolationg, the third one w