“肺肠合治法”对肠道菌群失调合并过敏性哮喘大鼠 气道重塑的免疫调节机制研究-免疫学专业论文.docxVIP

成都中医药大学 成都中医药大学 2012 级硕士学位论文 万方数据 万方数据 中文摘要 实验目的：本课题在建立大鼠肠道菌群失调合并过敏性哮喘的基础上，予肺肠合 治法的代表方剂加味升降散进行干预，通过对本动物实验的观察，选择与哮喘气 道重塑相关的多项指标，探讨肺肠合治法对肠道菌群失调合并过敏性哮喘大鼠气 道重塑的影响，为“肺与大肠相表里”脏腑相关理论寻找实证依据。 实验方法：以 SD 大鼠为研究对象，在抗生素诱导其肠道菌群失调模型基础上采 用卵清蛋白（OVA）、氢氧化铝（Al(OH)3）混悬液在大鼠双侧胸部、腹股沟及腹 腔进行注射和雾化吸入激发哮喘，建立肠道菌群失调合并过敏性哮喘大鼠模型。 加味升降散干预后，通过肺、肠同步观察的研究思路，用病理学方法观察大鼠肺 肠组织的病理形态变化，用 ELISA 法检测大鼠血清和支气管肺泡灌洗液（BALF） 中 TGF-β1、IL-17 含量；用免疫组化法检测肺、肠内 MMP-9、TIMP-1 的含量与 比值。 实验结果：1.行为学观察：与肠道菌群合并过敏性哮喘大鼠模型组相比，中药肺 肠合治干预组大鼠呼吸困难、流涕、抓挠等症状有不同程度减轻；在饲养过程中， 大鼠毛色光泽度、整体情况也较好； 2.组织病理形态显示，肺肠合治组大鼠肺内支气管壁及周围组织炎性细胞浸润、 黏膜上皮损伤较模型组有减轻，各组肠组织内炎症反应及肠黏膜的损伤也较模型 组有缓解； 3.肺功能实验中模型组呼吸频率（F）与正常对照组相比有显著增高（P0.05））, 每分钟通气量（MVb）、吸气流量峰值（PIFb）呼气流量峰值（PEFb）显著减小 （P0.05 或 P0.01）。与模型组相比较，肺肠合治组可降低大鼠 F（P0.05 或 P0.01），升高 MVb、PIFb、PEFb（P0.05 或 P0.01）； 4.模型组鼠 BALF 及肠黏液中 sIgA 含量明显低（P0.05 或 P0.01）空白对照组； 与模型组比较，阳性组及治疗组大鼠 BALF 及肠黏液中 sIgA 含量较模型组升高 （P0.05 或 P0.01）； 5.相关细胞因子水平 1）模型组大鼠血清及 BALF 中 TGF-β1、IL-17 含量明显高于空白对照组大 I 鼠（P 0.05 或 P0.01）；与模型组比较，阳性组及肺肠合治组对 TGF-β1、IL-17 有不同程度下调作用（P0.05），具有显著性差异有统计学意义。 2）免疫组化结果显示：模型组与空白组比较 MMP-9/TIMP-1 比值失衡严重 （1）；阳性组及肺肠合治干预组与模型组比较 MMP-9 水平升高缓慢、TIMP-1 水平升高明显（P0.05）；对 MMP-9/TIMP-1 的比值接近正常，有显著调节作用。 实验结论：肺肠合治法改善肠道菌群失调合并过敏性哮喘大鼠气道重塑的调节机 制可能有二：其一，通过减少肺组织的炎性细胞的浸润，达到修复气道粘膜损伤， 进而恢复损伤组织的结构；其二，调控 TGF-β1、IL-17 表达、降低肺组织中 MMP-9、 TIMP-1 水平，调节 MMP-9/TIMP-1 比值趋于平衡，达早期拮抗气道重塑的作用。 关键词： 肠道菌群合并过敏性哮喘 肺肠合治法 细胞因子 调节作用 II ABSTRACT Objective: This subject establish rat intestinal flora imbalance merger on the basis of allergic asthma, lung Chang He Zhi to representatives of prescription flavored Shengjiangsan intervention, through the observation of this animal experiments, selection and airway weight plastic related to a number of indicators, to explore combined treatment method for lung intestinal intestinal flora merger allergic asthma rat airway remodeling, the lung and Large Intestine organs theory to find empirical basis. Methods:In SD rats for the study, antibiotic-induced intestinal flora model using ovalbumin (OVA) based on aluminum hydroxide (Al (OH) 3)