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六种禽病原检测的基因诊断芯片的研制跟临床应用

中国农业科技导报 , 2009 , 11 ( 5) : 108 - 113 Jou rnal of A gricu ltu ral Science and Technology 六种禽病原检测的基因诊断芯片的研制及临床应用 1 2 2 1 1 张  伟 ,  田振宇 ,  郑彤彤 ,  张秀美 ,  胡北侠 ( 1. 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 , 济南 250 100; 2. 山东澳兰生物工程研究院 , 山东 青岛 26610 1) ( ) ( 摘  要 :利用 R TPCR 或 PCR 技术扩增出新城疫病毒 newca stle disease viru s 、低致病性禽流感病毒 avian ) ( ) ( ) influenza 、传染性支气管炎病毒 infectiou s bronch itis viru s 、减蛋综合征 egg drop syndrom e 、传染性喉气管炎 ( ) ( ) 病毒 infectiou s laryngotracheitis 、鸡毒支原体 m ycop la sm a gallisep ticum 基因的各一段保守序列 , 以纤维素膜 ( ) 作为生物芯片制作的基质 ,通过微量点样技术产生二维 DNA 探针阵列 ,即基因芯片 gene ch ip 。从可疑病料 中提取病原核酸 ,通过 R TPCR 掺入法标记 b io11dU TP,将获得的标记 PCR 产物和基因芯片进行杂交 ,通过 检测杂交信号的强弱来实现对生物样品的快速 、高效检测及分析 。芯片灵敏度高于 R TPCR 和病毒分离 ,分 2 4 别为 R TPCR 和病毒分离的 10 倍和 10 倍 ,有忠实的特异性 ,动物实验结果符合率在 95%以上 。 关键词 :产蛋下降致病病原 ;基因芯片 ;鉴别诊断 ;临床应用 中图分类号 : S851   文献标识码 : A    文章编号 :(2009) E stablishm en t and C lin ica l A pplica tion of Gene Ch ip s for D iagnosing S ix K inds of Poultry D isea se Pa thogen s 1 2 2 1 1 ZHAN G W

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