技术应用高效液相色谱法进行血红蛋白分析.pptVIP

应用高效液相色谱法进行血红蛋白分析 血液室 颜慕霞 地中海贫血及异常血红蛋白病知识简介 一、地中海贫血综合征（地贫 ）是指因遗 传的缺陷，血红蛋白中的一种或几种 珠蛋白肽链的合成受到抑制，但珠蛋 白肽链的分子结构并无异常的一种单 基因遗传病 。 二、异常血红蛋白病 异常血红蛋白则是指那些由于遗传上的 缺陷，导致珠蛋白分子结构异常的血红 蛋白。由于异常血红蛋白导致溶血性贫 血等临床表现，叫做异常血红蛋白病。 异常血红蛋白病与地贫常并存于同一个患者称为异常血红蛋白病合并地贫。 血红蛋白的组成 由一个珠蛋白分子和四个亚铁血红素结 合而成。 每一个珠蛋白分子皆有两种不同的珠蛋 白肽链双结合构成一种Hb的类型。 人类主要有以下四种珠蛋白肽链：α、 β 、δ和γ 地贫和异常血红蛋白病的发生 当控制珠蛋白链合成的珠蛋白基因发生 突变或缺失，就使相应的珠蛋白链合成 减少或 完全不能合成，导致Hb合成异 常，就出现了异常Hb病或地贫。 正常的三种血红蛋白 HbA: α2β2 HbA2 : α2 δ2 HbF: α2 γ 2 正常三种血红蛋白珠蛋白肽链的构成 α2 β2 δ2 γ 2 HbA HbA2 HbF (α2β2) (α2 δ2) (α2 γ 2) 地贫的类型 根据所缺乏的珠蛋白肽链进行分类，α 链，β链或δ链合成缺乏或缓慢者，分 别被称为α地贫，β地贫，或δ地贫。 β和δ或β和γ链合成都减少或缓慢者 分别称为βδ或βγ地贫。 α地贫 轻型：静止型 标准型 可见Hb Bart’s（γ4） 中间型： 血红蛋白H病（ β4 ） 重型： 血红蛋白Bart’s病 α链结构异常产生的血红蛋白 血红蛋白Constant Spring （HbCS) α链的羧基端后多出31个氨基酸 血红蛋白QS 碱基突变非缺失型HbH病 血红蛋白Q (74天AA变组AA) β地贫 轻型： 重型： 中间型： 当控制β链的基因发生突变或缺失时， β链减少，多余的α链将与δ、γ链形成HbA2和HbF，所以β地贫时HbA2和HbF均有不同程度的增高。 β链结构异常产生的血红蛋白 HbE （α2β226谷 赖） HbS （α2β26谷 颉） HbC （α2β26谷 赖） 常用检测地贫及异常血红蛋白病方法 血常规是检测地贫及异常血红蛋白病最基本的实验之一 。 血红蛋白电泳是检查地贫与异常血红蛋白病最主要及最常用的实验诊断方法。 高效液相色谱法。 地贫的基因诊断 。 血常规 6个基本参数：RBC，Hb，HCT，MCV，MCH，MCHC。 MCV明显降低是地贫的首选筛查指标，通常MCV80fl，MCH25pg。 红细胞形态：小细胞低色素改变为主，异形性明显 血红蛋白分析 电泳：血红蛋白电泳是检查地贫与异常血红蛋白病最主要及最常用的实验诊断方法。 我院检验科血液室自从80年代初即开展以醋酸纤维素为介质的血红蛋白电泳实验诊断地贫与异常血红蛋白病。 血红蛋白电泳仪 于1998年购入一台美国海伦娜公司的 REP全自动凝胶电泳仪取代手工电泳进 行地贫与异常血红蛋白的检测，使电泳 结果更加准确，很好地支持了临床医生 对此二种疾病的诊断。 血红蛋白电泳仪 但是电泳的价值受到一定的限制，因为 有一些异常血红蛋白的电荷改变极微或 没有改变，在电泳时它们不能被查出， 会造成临床上的漏诊，同时由于电泳对 各种血红蛋白成分的定量不够标准化， 经常会给结果的判断造成困难 地贫的基因诊断 α地贫基因诊断试剂盒可同时检测中国 人中常见的三种缺失型α地贫，即东南亚缺失型（－－SEA ），左侧缺失型 （－α4.2 ），右侧缺失型（－α3.7 ）。 并且还可检出临床上无症状的静止型 α地贫。 地贫的基因诊断 β地贫基因诊断试剂盒可对17个常见β 珠蛋白基因突变位点行检测，结果易于 判定。 地贫的基因诊断 但地贫基因分析不能检测异常血红蛋白病，对临床上异常血红蛋白病有漏诊的情况发生，而且价格昂贵，不适于大量大面积筛查。 高效液相色谱法 检验科血液室