手性胺酞胺型液相色谱手性固定相的制备及几种氨基酸衍生物的（可编辑）.docVIP

手性胺酞胺型液相色谱手性固定相的制备及几种氨基酸衍生物的 第 期 分析化学 研究报告 第 卷年 月 手性胺酞胺型液相色谱手性固定相的制备及 几种氨基酸衍生物的拆分 谭徐林 侯士聪 王敏’ 中国农业大学理学院应化系,北京 摘 要 用 一苯基一对甲基苯基乙基胺 与 异亮氨酸制得含两个手性中心的手性选择剂,以唬泊 酸酥作为连接臂,将手性选择剂键合到氨基丙基硅胶上制得手性固定相。以正己烷一异丙醇为流动相,利用该 固定相对氨基酸衍生物进行高效液相色谱手性拆分,并考察了流动相中异丙醇含量对手性拆分的影响。结果 表明,该手性固定相对所分析的氨基酸衍生物大部分都具有一定的拆分能力。当异丙醇含量为 时,亮氨 酸与苯丙氨酸的苯甲酞甲醋衍生物获得基线分离。当异丙醇含量为 时,亮氨酸、撷氨酸、丙氨酸、谷氨酸 的 一二硝基苯甲酞甲醋衍生物获得基线分离。 关键词 手性固定相,高效液相色谱,氨基酸衍生物,手性拆分 引 言 简单、快速地分析和制备手性化合物一直是药物学家和有机化学家追求的目标。手性固定相 高效液相色谱法因其简单、快速和准确的优点,已成为分析和分离对映体的最重要的 方法 “刷型”手性固定相 是 手性固定相中非常重要的一类,这类 一般通 过一定的间隔臂,连接一个单分子层的手性有机分子到硅胶载体上而制得,因而被称之为“刷型”等〕最早开展这类手性固定相的研究,主要是将氨基酸的 一二硝基苯甲酸衍生物键 合到硅胶上。徐修容等〔也将氨基酸的酞胺衍生物键合到硅胶上制得手性固定相并对氨基酸衍生物 进行拆分。具有不对称中心的手性固定相的研制,是手性色谱发展的前沿领域。最近的研究动向是对 已有固定相进行结构的修饰川和寻找新的廉价手性源。 目前,未衍生的氨基酸的手性检测用配体交换柱’“〕或者配体交换毛细管电泳”〕已满足,也可用冠 醚手性柱‘来进行手性拆分,但氨基酸衍生物的手性检测还有许多难点。本研究利用易得的手性原料 苯基一对甲基苯基乙基胺与异亮氨酸缩合制得含两个手性中心的手性选择剂,通过键合将其连 接到氨丙基硅胶上,制得未见报道的“刷型”手性固定相,用于拆分氨基酸衍生物获得了较好结果。 实验部分仪器与试剂核磁共振仪 芬兰 公司元素分析仪 德国公司液相色谱装柱机北京福思源 系列高效液相色谱仪,包括型四元泵,型可变波长紫外检测器 和化学工作站美国安捷伦公司 。球形硅 胶青岛美高化工厂,粒径 ,平均孔径 ,比表面叔丁氧 基异亮氨酸上 海吉尔生化股份有限公司 卜一苯基 一对甲基苯基乙基胺江苏扬农化工股份有限公司 一乙氧基 一乙氧碳酞基一 一二氢哇琳 氨丙基三乙氧基硅烷 ,美国 二环己基碳二酞亚胺 、亮氨酸、正撷氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、谷氨酸、精氨酸北京化学试剂公司 其 它试剂均购自北京化学试剂公司并经重蒸后使用。 收稿 接受 分析化学 第 卷 实验方法 氨丙基硅胶的制备 经酸活化的硅胶在 ℃和 存在下真空干燥 。加 入干燥甲苯,装上分水器,在 ℃下回流分水 。加人 氨丙基三乙氧基硅烷,回流,用 砂芯漏斗过滤,依次用无水甲醇、甲苯和无水甲醇洗涤,抽干,在 ℃下真空干燥 。元素 分析结果手性固定相的制备 合成路线如图 所示。将叔丁氧 基异亮氨酸放人的三口烧瓶中,加四氢吠喃搅拌溶解,冰盐浴至 然后滴加的四氢吠 喃溶液,再滴加的四氢吠喃溶液,保持在℃反应 ,然后自然升温到室温继续反应。过滤除去不溶的副产物,滤液旋蒸脱溶除去四氢吠喃得产物 白色 。加入二氯甲烷溶 以 今 勺义 勺 勺 。 。 、 、火 共粱、洲 , 犷岁一冬汀肾 今 图 手性固定相的合成路线解,经 的 溶液、饱和 溶液、饱和 溶液洗涤后,用无水仇干燥。将干燥好的溶 液滤人的三口烧瓶中,冰盐浴至 ,滴加三氟乙酸,搅拌反应旋蒸脱溶得产物 白色固体 。将固体溶于无水毗陡中,冰盐浴至。℃,滴加 瑰拍酸醉的毗陡溶液,然 后室温搅拌反应 。旋蒸脱溶除去毗睫得白色固体,用乙酸乙酉歇石油醚 码重结晶得产物 白色固体。将产物 溶于无水四氢映喃中,冰盐浴至 ,加入 氨丙基硅胶,加人 ,反应滤掉溶液,固体用四氢吠喃、无水甲醇、乙醚洗涤℃真空干燥得手性固定相。 色谱条件 色谱柱为不锈钢柱 。 固定相分散于四氯化碳中,超声波处 理 一,采用高压匀浆法装柱,装柱压力为 ,顶替液为正己烷 异丙醇 均。色 谱分离均在室温下进行,流动相经过滤、超声脱气后使用,流速为 氨基酸衍生物参照文献 〕制备,用正己烷 异丙醇 岭溶解后进样,检测波长均为 。色谱柱死时间用 一三叔丁基苯测定,为 结果与讨论手性固定相的表征 各中间体产物都经核磁共振氢谱确证其结构。产物 一 , 一 , ,,,, , ,, 一 , 一 , ,