中国蜂胶水提物抗肿瘤活性功效成分研究-江苏农业科学.PDF

江苏农业科学　２０１８年第４６卷第１２期 — １５３— 王月华，王变变，尹旭升，等．中国蜂胶水提物抗肿瘤活性功效成分研究［Ｊ］．江苏农业科学，２０１８，４６（１２）：１５３－１５６． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１８．１２．０３８ 中国蜂胶水提物抗肿瘤活性功效成分研究 １ １ ２ １ １ 王月华 ，王变变 ，尹旭升 ，付崇罗 ，玄红专 （１．聊城大学生命科学学院，山东聊城２５２０５９；２．山东省蜂业与蜂产品质量检验所，山东泰安２７１０００） 　　摘要：拟研究中国蜂胶水提取物（Ｃｈｉｎｅｓｅｐｒｏｐｏｌｉｓｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔ，简称ＣＰＷＥ）及其分离纯化的１１种化学成分（咖啡 酸、阿魏酸、异阿魏酸、３，４－二甲氧基肉桂酸、短叶松素、咖啡酸苄酯、咖啡酸苯乙酯、芹菜素、松属素、白杨素、高良姜 素）对神经胶质瘤细胞（Ｕ８７和Ｕ１７２）的细胞毒性。将正常培养的神经胶质瘤细胞（Ｕ８７和Ｕ１７２）经不同浓度的蜂胶 提取物（２５、５０、１００ｍｇ／Ｌ）及其分离纯化的１１种化学成分（４０、８０、１６０ ｍｏｌ／Ｌ）分别处理２４、４８ｈ，在倒置显微镜下观 μ 察其细胞形态，用磺酰罗丹明Ｂ（ｓｕｌｆｏｒｈｏｄａｍｉｎｅＢ，简称ＳＲＢ）比色法检测细胞存活率。结果表明，咖啡酸、阿魏酸、异 阿魏酸、３，４－二甲氧基肉桂酸对神经胶质瘤细胞均没有细胞毒性；短叶松素、咖啡酸苄酯、咖啡酸苯乙酯、芹菜素、松 属素、白杨素、高良姜素明显抑制神经胶质瘤细胞的增殖。由结果可知，中国蜂胶水提物的抗肿瘤功效成分主要是黄 酮类化合物和酯类化合物。 　　关键词：中国蜂胶；水提物；抗肿瘤；功效成分；细胞存活率 　　中图分类号：Ｓ８９６．６　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１８）１２－０１５３－０４ 　　蜂胶是西方蜜蜂采集植物树脂并混入唾液腺分泌物后经 物的应用提供理论依据。 加工咀嚼而成的一种树脂状物质。蜂胶作为一种重要的蜂产 １　材料与方法 品，已有研究表明其具有丰富而独特的生物活性物质，具有抗 ［１－５］ １．１　试验材料 细菌、抗病毒、抗炎症、抗肿瘤、抗真菌等作用 。目前，从 蜂胶中鉴定出的化学组分多达２０多类、３００多种，主要包括 中国蜂胶产自山东省，胶源植物主要为杨树；巴西绿胶取 ［６－８］ 自巴西ＭｉｎａｓＧｅｒａｉｓ州，主要植物来源为酒神菊属。主要试 黄酮类、酚酸类、萜烯酸、类固醇类、氨基酸类 等物质。蜂 胶易溶于有机溶剂，目前对中国蜂胶乙醇提取物（ｅｔｈａｎｏｌ 剂有 ＤＭＥＭ培养基（美国 Ｇｉｂｃｏ公司）；胎牛血清（美国 ｅｘｔｒａｃｔｏｆＣｈｉｎｅｓｅｐｒｏｐｏｌｉｓ，简称ＥＥＣＰ）的研究比较深入，对中 Ｈｙｃｌｏｎｅ公司）；胰酶、磺酰罗丹明Ｂ（美国Ｓｉｇｍａ公司）；细胞 国蜂胶水提物（Ｃｈｉｎｅｓｅｐｒｏｐｏｌｉｓｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔ，简称 ＣＰＷＥ）的 培养皿、９６孔板（美国 Ｆａｌｃｏｎ公司）；三羟甲基氨基甲烷 研究较少。中国蜂胶水提物不仅可以避免有机溶剂对动物产 ［Ｔｒｉｓ，生工生物工程（上海）股份有限公司］。其他试剂均为 ［９］ 分析纯。 生的有害作用 ，而且有研究发现，中国蜂胶水提物有较好 的生物活性，具有非常好的应用价值，正越来越来得到人们的 中国蜂胶水提物和中国蜂胶乙酸乙酯提取物（ｅｔｈｙｌ 重视［１０］。 ａｃｅｔａｔｅｅｘｔｒａｃｔｏｆＣｈｉｎｅｓｅｐｒｏｐｏｌｉｓ，简称 ＥＡＥＰ）从中国蜂胶中 本研究使用的中国蜂胶水提物是通过制备高效液相色谱