实验2：分离以尿素为氮源微生物_附件.pptVIP

思考： 采用什么方法从土壤中分离出以尿素为氮源的微生物？ 如何判断分离出的细菌确实能将尿素分解？ 一.实验原理 以尿素为氮源的微生物培养一段时间后，由于细菌产生的脲酶向周围扩散，将培养基中尿素的分解，产生的NH3使培养基的pH由原来的中性变为碱性，于是培养基中的酚红变成红色，菌落的周围会产生红色环带，红色环带愈大，表明这种菌利用尿素的能力愈强。 1、配制培养基 尿素培养基 葡萄糖 0.025g NaCl 0.12g K2HPO4 0.12g 琼脂糖 0.5g 酚红 0.25g 尿素 10ml 琼脂和琼脂糖 琼脂是一种未被纯化的混合物，主要成分为琼脂糖和琼脂果胶，还含有少量的含氮化合物，及其它有机杂质和不溶性杂质。琼脂作为微生物固体培养基不可缺少的组成成分，其优点是： ①其主要成分不能被微生物利用； ②可使培养基固化； ③不影响培养基中其他营养物质被细菌吸收。 思考？ 选择培养基 2、倒平板 2、倒平板 3、制备细菌悬液 涂布法分离细菌：在无菌条件下，分别取0.1 mL的稀释度为10-3 、10-4和10-5的土壤稀释液（细菌悬液） ，分别加到装有全营养LB培养基和尿素培养基的培养皿（空白平板）中； 再将保存在