第3章节生物化学检验实验室基本知识-湖北中医药大学.pptVIP

（二）实验方法评价的基本内容 实验方法评价的基本内容： 通过一系列评价试验，检测能表示其精密度和准确度的相应误差类型及大小与规定的性能指标相比较，决定候选方法能否可以接受。 （三）实验方法选择与评价的步骤 查阅文献 确定候选方法 初步评价试验 最后评价试验 评价后试验 方法应用 四、方法学评价试验 （一）重复性试验 （二）回收试验 （三）干扰试验 （四）线性范围试验 （五） 方法比较试验（对比试验） 重复性试验 目的：检测候选方法的随机误差，考察其精密度。 方法：将同一材料分成数份，对其进行反复多次的测定，计算出均值（x）、标准差（s）、变异系（CV ）。 原理：批内重复性测定是将1份稳定样本随机插入临床血清样本序列中测定，做批内重复测量，所得的批内不精密度CV应小于允许分析误差（EA）的1/4为合格。EA采用CLIA′88可接受范围指标。 一般要求批内CV＜5％ 实验操作 注意事项（了解） 1.样本的选择 2.被测物的浓度 3.离群值的剔除 4.不能单独将重复样本设为一组测定20次，而应该与临床血清样本随机排序后穿插测定。 5.评价标准 Ga.n 回收试验 目的： 用来考察候选方法对加入到常规分析样品中的纯分析物含量进行准确测定的能力，其目的是检测候选方法的比例系统误差（PE），以恒量该方法的准确度。 意义： 测得的比例系统误差（PE）值随被测物浓度的增加而增加。 实验内容 原理： 将浓度已知的含被测物的各校准液加入至病人样品（原样品）中成为一系列分析样品（回收样品），在原样品中加入相同体积的无被测物的溶剂作为基础样品，用候选方法对这些样品进行同步测定，计算回收率、平均回收率，考察候选方法的比例系统误差。一般项目的平均回收率应在95％～105％之间。 试剂： 1.样品 收集无肝炎病毒污染、无溶血、无脂浊的人（或动物）血清，采用候选方法测定其浓度，并用生理盐水稀释至3.0mmol/L。 2.葡萄糖校准液 浓度分别为：36.0mmol/L 、70.0mmol/L 。 3.其他试剂 GOD-POD法测定血糖试剂 第六节 实验方法的选择与评价 实验方法 为临床提供准确可靠的信息 临床生化检验分析 保证 应用 实验方法的选择和评价 实验误差 方法学评价指标 实验方法选择与评价的原则、内容和步骤 方法学评价试验 方法性能判断 主要内容： 、实验误差 （一）概念 实验误差简称误差（error），指测量结果与被测量的真值的差异。 （约定真值） 周期性系统误差 图2-3　误差的分类 误差 系统误差 随机误差 恒定系统误差 可变系统误差 比例系统误差 复杂系统误差 已定系统误差 未定系统误差 （二）分类 根据变化性质不同，误差可以分为系统误差和随机误差两大类 1.系统误差（systematic error，SE） 定义：相当于不准确度（inaccuracy）或偏倚（bias）， 指重复多次测量的结果均值（X）与真值（T）之差。 特点: ①具有单向性，而没有随机性，常有一定的大小和方向； ②增加测定次数也不能消除 。 系统误差分类：按变化规律 恒定系统误差（CE）：由干扰物引起的大小恒定的误差，该误差与被测物浓度无关，而与干扰物浓度相关，因此有正负之分。能够修正 可变系统误差： 比例系统误差（PE）： 周期性系统误差 复杂系统误差 指与被测物浓度的变化而成比 例变化的误差，能够修正。 周期性出现的误差，能够修正。 方向和大小未知或部分未知但通常可以估计其界限，其中的一部分可以在测试中加以消除。 造成系统误差的主要原因： ①方法误差：主要是由于方法分析性能存在固有缺陷所致 如方法特异性不高、样本中非测定成分的干扰物等； ②仪器和试剂误差：主要见于仪器波长未经校正、量器不 准、试剂质量不好等造成。 最严重，最难避免 2.随机误差（random error，RE） 定义：相当于不精密度（imprecision），或绝对偏差（di），指某次测量值（xi）与重复测量的结果均值（X）之差 特点: ①可正可负、大小不定 ； ②分析步骤越多，造成这种误差的机会就越多。 ③增加测定次数，其算术均值接近于真值，数据呈正态分布 。 ④不可避免、必然出现的，但可控制在一定范围内。 常用表示方法： 最常见的：标准差（s）、变异系数（CV） 造成随机误差的原因： ①技术人员的操作不规范 ②仪器、试剂、