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磷脂酶D制备及应用的研究进展 PAGE II 大 连 民 族 学 院 本 科 毕 业 设 计（论 文） 磷脂酶D制备及应用的研究进展 The research progress on preparation and application of Phospholipase D 学 院（系）： 生命科学学院 专 业： 科学与工程 学 生 姓 名： 学 号： 2006035109 指 导 教 师： 评 阅 教 师： 完 成 日 期： 2012年6月10日 大连民族学院 PAGE IV 摘要 磷脂具有良好的应用前景，但天然磷脂因结构单一、含量低使其应用受限。改性磷脂功能性强、来源广泛,近年来备受关注。相对于物理化学改性，酶改性是当前比较温和高效的改性方法，其中磷脂酶D因能专一的作用于磷脂的活性基团部位而应用最为广泛，且产酶效率相对较高，酶的选择性也较强。 迄今为止，已有多种磷脂酶D被阐明，磷脂酶D的高产菌株的选育也有了自然选育、诱变育种和分子生物学育种的方法。磷脂酶D的自然选育方法已经处于成熟阶段，但所得菌株产酶活力很低，现今最高也不超过0.4U/mL。现在应用较多的是自然选育和物理化学诱变相结合的方法得到高产菌株，磷脂酶D高产菌株中约有80%是采用紫外线诱变的方法获得的。通过此方法获得的高产菌株产酶活力可达0.8U/mL以上。由于分子生物学的发展，磷脂酶D菌株的微生物选育成为最先进且最有前景的选育方法，此种选育方法还处在实验室阶段，其工业化应用还有待发展。路福平等人采用分子生物学方法获一株高产毕赤酵母菌，采用酶联比色法测得酶活1.20U/mL。磷脂酶D主要来源于动植物及微生物，天然磷脂酶D含量很低，工业上采用发酵法生产磷脂酶D。目前采用较多的是液体发酵，也有人通过固态发酵生产磷脂酶D。从发酵菌产的初级代谢产物中提取磷脂酶D，主要方法有离心法、有机溶剂浸提等。经盐析、等电点沉淀、超滤等方法纯化，再用薄板层析法、分光光度法、酶联比色法和固体显色法等测定酶活力。胡博新等通过色谱法以获得电泳纯的磷脂酶D，回收率达31%，但与国外45%还有一定差距。 磷脂酶D的应用广泛，主要应用于食品工业和医药工业，在水产品养殖业也所应用。本综述将为磷脂酶D的开发提供参考资料及其工业生产奠定良好的基础。 关键词：磷脂；磷脂酶D；菌株选育；分离纯化；应用 Abstract Phospholipids has good application prospect, but natural phospholipids use is limited for single structure and low content . Modified phosphatide is functional 、Source wide and reaching moer attention in recent years. This paper reviewed the properties of phospholipids and the modification methods, relative to the physical and chemical modification, enzyme modification is the current mild efficient modification methods. Phospholipase D is most widely used because of it`s specifically effect on the activity parts of phospholipids , and production efficiency of enzyme is opposite taller, the selectivity of enzyme are stronger. So far, there have been a variety of Phospholipase D clear, Phospholipase D highavermectinproducing strain also had same methods such as natural breeding, induced breeding and molecular biology breeding . The natural breeding of phospholipas