褪黑素对试验性动脉粥样硬化兔心脏的保护作用及-安徽医科大学学报.PDF

安徽医科大学学报　ＡｃｔａＵｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓＭｅｄｉｃｉｎａｌｉｓＡｎｈｕｉ　２０１７Ｄｅｃ；５２（１２） ·１７４７· 网络出版时间：２０１７－１０－１６９：２０　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０６５．Ｒ０９２０．００１．ｈｔｍｌ ◇基础医学研究◇ 褪黑素对实验性动脉粥样硬化兔心脏的 保护作用及其可能的分子机制 余　沛，王　雪，王　怡，周　青，汪　渊，朱华庆 摘要　目的　观察褪黑素（ＭＬＴ）对实验性动脉粥样硬化兔 病、心肌缺血以及心肌肥大等，但其发病机制复杂， 心脏的保护作用及其可能的分子机制。方法　普通级纯种 有待于进一步研究［１］。褪黑素（ｍｅｌａｔｏｎｉｎ，ＭＬＴ）是 新西兰大耳白兔随机分为３组，正常组：饲喂普通饲料；模型 ［２］ 一种内源性分泌吲哚类物质 ，主要由哺乳类动物 组：饲喂高脂饲料（普通饲料＋１％胆固醇＋５％猪油）；褪黑 和人类松果体分泌，具有很强的抗氧化作用，可抑制 素组：饲喂高脂饲料的同时ＭＬＴ灌胃１０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）治疗。 ［３］ 平滑肌细胞迁移炎症的发生等 。肌球蛋白轻链 纯种大耳白兔适应性饲养一周后，采用高脂饮食诱导造模， 激酶（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＬＣＫ）是一种重要 同时给予褪黑素药物治疗。于１２周后处死进行采血，检测 ［４］ 血清中血脂等指标。取动脉进行油红染色，检测脂质斑块形 的肌动蛋白调节因素，研究 显示动脉粥样硬化病 成情况；取心脏组织，包埋后 ＨＥ染色观察心肌组织的形态 程中ＭＬＣＫ可以在１９位丝氨酸和１８位苏氨酸上磷 变化；Ｍａｓｓｏｎ染色检测心肌组织中胶原纤维的变化；Ｗｅｓｔｅｒｎ 酸化肌球蛋白轻链（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎ，ＭＬＣ），导致 ｂｌｏｔ法检测ｐ３８／丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）通路相关蛋 肌球蛋白构象发生变化形成张力纤维，引起内皮细 白及肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）、肌球蛋白轻链（ＭＬＣ）、肌 胞骨架重排，导致动脉内膜屏障完整性被破坏，脂质 球蛋白轻链磷酸化（ｐＭＬＣ）的表达水平。结果　动脉油红 ［５］ 更易沉积 。该实验通过观察褪黑素对动脉粥样 染色结果显示模型组出现大量脂质斑块，证明造模成功。血 硬化兔心肌组织结构的影响及对 ＭＬＣＫ蛋白的影 脂结果显示模型组总胆固醇（ＴＣＨ）、三酰甘油（ＴＧ）浓度明 响，探讨褪黑素对动脉粥样硬化心肌损伤的保护作 显上升，而褪黑素组相对模型组下降。油红染色ＨＥ染色结 用及其可能的分子机制。 果显示ＭＬＴ能改善心肌组织形态的紊乱情况，Ｍａｓｓｏｎ染色 结果显示 ＭＬＴ能缓解心肌组织胶原纤维的堆积。Ｗｅｓｔｅｒｎ １　材料与方法 ｂｌｏｔ结果显示ＭＬＴ能下调ｐ３８的磷酸化水平以及 ＭＬＣＫ蛋 白的表达水平，以及下调 ＭＬＣ的磷酸化表达水平（Ｐ＜ １．１　主要仪器　酶标仪（ＴｈｅｒｍｏＭｕｌｔｉｓｋａｎＧＯ）、低 ００５）。结论　ＭＬＴ可能通过降低 ＭＡＰＫ通路中相关蛋白 温离心机（Ｌｅｇｅｎｄｍｉｃｒｏ２１Ｒ）（美国ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ公 ｐ３８的磷酸化调控 ＭＬＣＫ蛋白的表达，从而降低 ＭＬＣ的磷 司）；大制冰机（ＡＦ１００，意大利 ＳＣＯ