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- 2018-09-14 发布于天津
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phagevectors柯斯质粒载体cosmidvectors人工染色体载体
M13、f1和fd,是一类丝状大肠杆菌噬菌体,它们都含有长度为6.4kb、彼此具有很高同源性的单链环状DNA分子。这些丝状噬菌体表现出一系列其它载体所不具备的优越性: 有时亦称为感染性的单链 M13噬菌体颗粒的外形呈丝状,在颗粒中包装的仅是(十)链的DNA,有时亦称为感染性的单链(图5-11)。 M13噬菌体首先吸附在F性须上,其吸附的位点看来是在性须的末端(图5-12)。噬菌体的基因组从性须末端进入到细胞的内部,进入细胞内部的M13(+)链DNA,便起到一种模板的作用,合成出互补的(一)链 DNA。由此形成的双链形式的M13DNA,称为复制型 DNA。它按θ形式进行几轮复制之后,基因 Ⅱ的产物便在RFDNA的正链待定位点上作切割反应,形成一个缺口。这样,M13基因组的扩增活动便正式开始启动。其基本特点是利用大肠杆菌的DNA聚合酶I,以环形的MI3(一)DNA为模板合成 M13(+)DNA。当DNA复制叉沿着模板DNA分子转移到复制终点时,在基因Ⅱ编码产物的作用下,新合成的(十)DNA便会被切除下去,并进一步环化形成单位长度的 M13基因组DNA(图5-13)。 * * 成熟的噬菌体颗粒仅能感染E.coli的F+细胞,这是因为这种噬菌体的感染位点在性散毛上。 通过感染或转化的方法能将M13DNA导人宿主菌中, 包装不受DNA大小的限制,其噬菌体颗粒的大小可随DNA的大小而改变
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