常见细菌形态学检查方法细菌感染的检测一病原学诊断方法.PPTVIP

A.Smear Preparation Procedure （二）方法与步骤 A．制片： ⑴ 涂片：取清洁玻片一张，在玻片的中央滴一小滴生理盐水（滴加生理盐水不宜过多）。用无菌牙签挑取牙垢少许，与玻片上的水滴混匀，涂布成一厘米大小的均匀薄膜。 ⑵ 干燥：将涂片放室温中自然干燥，切勿紧靠火焰烘烤，以免标本烤焦，损害菌体结构。 ⑶ 固定：持玻片一端，标本面向上，迅速通过火焰三次（约2～3秒），以玻片温度达到皮肤能耐受的温度为宜。固定的目的是杀死细菌，使其固定于玻片上，并能增强细菌对染料的通透性。 Smear preparation Heat fixing Overview of Smear Preparation Procedure Smear: size of a dime to form a thin film Dry : air dry Fix: through the warm air above the flame two or three times 2．革兰染色： ⑴ 初染：将已固定的涂片标本，加结晶紫染液于涂面上染色1 min(10s)，然后水洗。 ⑵ 媒染：加革兰氏碘液媒染1 min(10s) ，水洗。 ⑶ 脱色：滴加95%酒精，频频摇动载玻片，斜持载玻片，使脱下的染液流下，再次滴加酒精脱色，直至流下酒精无色或稍呈淡紫色为止