细胞工程及胚胎工程.pptVIP

体核移植技术实例 ——童第周教授用极细的玻璃管从鲫鱼未受精卵中吸出细胞核，再把鲤鱼囊胚细胞的核移植到去核卵中，组装成的新细胞经过培育长成鲤鲫。 ——小鼠的核移植 ——黑斑蛙的核移植 ——英国爱丁堡大学罗斯林研究所的伊恩·威尔莫特和基恩·坎贝尔于1997年2月27日首次用体细胞克隆培育出“多莉”（Dolly）。 ——“多莉”培育过程是：从一只绵羊体内取出未受精卵，用显微操作技术去核；取另一只成年绵羊的单个乳腺细胞，将其细胞核注入去核卵细胞中；待融合细胞发育成胚胎后，将其植入第三只绵羊子宫内，由它产下的羔羊就是“多莉”。 核移植应用前景 加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群的繁殖 增家濒危物种的存活数量 器官移植 转基因动物作为生物反应器，产生医用蛋白（疾病治疗） 克隆技术的社会伦理问题 禁止生殖性克隆人 不反对治疗性克隆 体外受精和胚胎体外发育-----试管婴儿的培育 过程 试管婴儿的研究现状 ——第一、二代试管婴儿的研究，分别针对女性或男性因素导致的不孕问题 ——第三代试管婴儿的研究主要是解决优生优育，即从多个受精卵中选择基因型最佳的进行胚胎移植。例如，通过PGD技术选择核型46，XX受精卵进行胚胎移植，可避免新生男婴患Y连锁遗传病。 ——目前胚胎移植成功率只有30%-40%，通常移植多枚受精卵。这种做法能够获得较高成功率，也造成了多胎怀孕、婴儿早产、出生时体重过重或过轻等问题，并可能导致新生儿脑瘫 胚胎移植 1. 牛胚胎移植的基本程序 ——用激素促使供体母牛超级排卵 ——选择良种公牛配种或人工授精 ——将供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来，检查其发育阶段 ——将桑葚胚或囊胚植入受体母牛子宫内 ——对受体母牛进行妊娠检查 ——对代孕母牛的护理 胚胎分割 1.基本程序 2.胚胎分割的实例 胚胎干细胞的应用 1. 干细胞及分类 ⑴干细胞是人和动物体保留的部分尚未分化、具有自我更新和分化潜能的原始细胞 ⑵大体分类 ——具有形成完整个体潜能的细胞（如受精卵和胚胎干细胞）称为全能干细胞 ——由胚胎干细胞进一步分化中形成的具有分化出多种组织潜能的细胞，称为多能干细胞（如造血干细胞） ——多能干细胞进一步分化形成的，只能分化成为一种或密切相关的两种细胞的干细胞（如神经干细胞）称为专能干细胞。 ——多能干细胞与专能干细胞合称为成体干细胞。成体干细胞在机体内普遍存在，在特定条件下它们产生新的干细胞，或按一定程序分化形成新的功能细胞，从而使成年动物的许多组织和器官具有修复和再生能力。 2.胚胎干细胞 ——由桑葚胚的内层细胞团或原始生殖腺中分离出来的一类细胞 ——胚胎干细胞体积小、核大、核仁明显 ——胚胎干细胞具有全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，进而形成一个完整的新个体 3.胚胎干细胞的分离与培养 本章小结： 克隆的概念 细胞工程的内容 植物细胞工程 -----植物组织培养的过程、条件理论基础、处理方法和应用，植物体细胞杂交的意义。 动物细胞工程-----动物细胞融合和单克隆抗体的制备 * * * * * * 获得细胞 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物组织培养和动物细胞培养的比较 2.动物的细胞融合 细胞融合是将不同种类的两种细胞经过特殊处理后放在一起，在某些促融因子作用下发生融合，形成杂种细胞。 细胞融合与细胞杂交 ——细胞融合是指由两个或多个细胞融合成一个细胞的现象 ——基因型不同的细胞融合称为细胞杂交 ——细胞融合是研究细胞之间遗传信息转移、染色体基因定位，以及创造新细胞株的有效途径。 诱导细胞融合的技术手段 ——灭活的仙台病毒、聚乙二醇等介导 ——低压交流电场中击穿细胞膜脂双层 病毒颗粒黏 附细胞表面 病毒颗粒穿 通细胞膜 细胞膜连接 细胞融合 动物细胞融合的原理： 利用:细胞膜的流动性 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 诱导方法 电刺激 化学（聚乙二醇） 电融合、PEG、灭活的仙台病毒 用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体 3.单克隆抗体技术： 抗体：来源、化学性质、作用 传统获取抗体的方法： 传统方法获取抗体，产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。 某种抗原注射到动物体内（需要反复注射） 动物体内产生抗体 从动物的 血清中分离出所需要的抗体 科学家分析、探索过程： 1.体内B淋巴细胞可以产生