硫熏和直接热风加热粉葛中葛根素含量及药效比较研究お.docVIP

硫熏和直接热风加热粉葛中葛根素含量及药效比较研究お 　　[摘要]为考察硫熏及直接热风加热的粉葛中葛根素含量及药效的差异，将鲜粉葛削皮、切小块分别制备成晒干、直接热风干燥及硫熏后热风干燥样品，分别测定样品水分含量。采用HPLC，比较晒干、直接热风干燥及硫熏后热风干燥样品中粉葛中主要药效成分葛根素的含量；建立醉酒模型，以SOD含量为指标，灌胃给药硫熏和非硫熏粉葛样品的水煎煮提取物，比较硫熏对粉葛提高醉酒模型小鼠肝脏、血清中SOD含量的影响；同时考察不同包装及贮存条件下，硫熏及非硫熏样品的霉变及虫蛀情况。结果显示硫熏后的粉葛样品，其葛根素含量发生明显变化，随着硫熏次数及硫磺用量的提高，其葛根素含量逐渐下降。且硫熏可显著降低粉葛提高的醉酒模型小鼠肝脏、血清中SOD含量，与晒干及直接热风干燥组均呈显著性差异。水分符合药典标准的硫熏样品和直接热风干燥样品均未发生虫蛀和霉变。研究显示硫熏可显著降低粉葛中主要药效成分的含量，降低粉葛的药效，表明硫熏后粉葛质量显著下降。而未硫熏直接热风干燥的样品其主要药效成分的含量、药效以及贮藏结果均与晒干相似，是一种较好的产地干燥工艺，可推广。 　　[关键词]粉葛； 硫熏； 质量下降； 热风干燥； 含量测定； 葛根素； 药效 　　粉葛是豆科植物甘葛藤Pueraria thomsonii Benth的干燥根，具有解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络和解酒毒的作用[1]。粉葛是我国传统的药食两用的中药，应用广泛[2]。葛根在唐代以来用于“解酒毒”，如《千金要方》以鲜葛根捣汁治酒醉不醒者。宋代《本草衍义》以葛根粉治酒醉者，曰：“病酒及渴者，行之甚良”。饮酒过度者多烦渴，损伤脾胃者又可出现纳差、呕吐等症。葛根能“主呕吐”（《神农本草经》）、“开胃下食……止烦渴”（《药性论》）。《中华本草》、《中药大辞典》中也记载了葛根有解酒醒脾之功效[34]。故粉葛对醉酒者，有对症之效。 　　硫磺熏蒸干燥是粉葛传统的产地加工干燥方法，硫磺熏蒸的主要目的是防虫防蛀，利于贮藏。然有研究提出在硫熏过程中产生的SO2和SO3与药材中水结合成亚硫酸与硫酸，会影响中药材及其提取物的酸碱性和化学成分。且过度硫熏也可能导致临床药效发生一定的变化，甚至产生毒性[57]。虽然2005年版《中国药典》已取消“硫磺熏蒸”的干燥方法表述，但是市场上流通的粉葛样品大多仍为硫熏后的粉葛。硫熏后粉葛增白明显，嗅之有酸味。近年来，硫熏替代技术研究逐渐出现，包括直接烘干、冻干技术、红外、微波等，目的是通过上述技术能够快速去除鲜品中的水分，同时能够杀灭虫卵，减少霉变。本实验以粉葛中主要药效成分葛根素的含量及醉酒模型小鼠肝脏、血清中SOD含量为指标，通过比较不同硫熏条件下的粉葛样品、直接热风干燥样品及晒干样品的差异，考察硫熏对粉葛质量的影响。同时通过本实验的研究，以期寻找合适的可以替代硫磺熏蒸干燥粉葛药材的干燥工艺。 　　1材料 　　Waters2.695液相色谱仪，Waters2.4.89紫外检测器，Empower色谱工作站，YMCPack ODSA C18色谱柱（46 mm×2.50 mm， 5 μm），KQ500DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），BP2.11D电子天平（德国Sartorius公司，1/10 万）， UNIQUES15型RODI实验室纯水系统（锐思捷科学仪器有限公司），FW80I高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）。 　　葛根素对照品（中国食品药品检定研究院，批号752.200108，纯度98%），甲醇（国药集团化学试剂有限公司、色谱纯），甲酸（南京化学试剂有限公司、分析纯），乙醇（南京化学试剂有限公司、分析纯）。二锅头（52°，北京红星股份有限公司），海王金樽（深圳海王集团股份有限公司），SOD检测试剂盒（南京建成生物工程研究所），BCA蛋白检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）。其他试剂均为分析纯，水为超纯水。 　　粉葛采自广西藤县标准化种植基地，经南京中医药大学陈建伟教授鉴定为豆科植物甘葛藤P. thomsonii的干燥根。 　　ICR小鼠，雄性，体重2.5～2.7 g，由南京医科大学动物中心提供，许可证号SCXK（苏 　　2方法与结果 　　2.1粉葛不同干燥样品制备 　　查阅文献及产地调研发现，粉葛产地加工多将药材挖出，用清水洗净泥土，除去芦头，尾梢，细须，刮去粗皮，趁鲜切成厚片或小块，干燥。如硫熏，则除去外皮后，将整个粉葛用硫磺熏12～48 h，切小块后烤干或晒干，硫磺用量为1%～2%。产地调研同时发现，粉葛存在多次硫熏和硫磺使用量不固定导致过度硫熏的情况。为考察硫熏对粉葛质量的影响，本文采用以下方法制备样品。 　　晒干