基于人肝癌细胞系SMMC-7721的三维培养条件研究-中国现代应用药学.PDFVIP

·论 著 · 基于人肝癌细胞系 SMMC-7721 的三维培养条件研究  郑义博 1 ，徐为峰 1 ，王帅 1,2,3 ，包永睿 1,2,3 ，孟宪生 1,2,3*(1.辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连 116600 ；2.辽宁省组分中药 工程技术研究中心，沈阳 110032 ；3.辽宁省现代中药研究工程实验室，辽宁 大连 116600) 摘要：目的 基于人肝癌细胞系 SMMC-7721 考察合适的海藻酸钠、氯化钙浓度，形成良好的海藻酸钙凝胶，优选三维 条件下肿瘤细胞的培养条件。方法 在 96 孔板中培养 SMMC-7721 细胞，基于 L 4 9(3 )正交表设计实验，以 MTT 法检测并 计算氯化钙溶液、柠檬酸钠溶液不同浓度与作用时间下的细胞存活率；结合正交优选结果，考察适宜的海藻酸钠浓度， 筛选适合的成胶、溶胶条件，并在三维培养模式下进行细胞活力确证。结果 最佳凝胶应用条件为 1%氯化钙溶液与 1% 海藻酸钠溶液作用 15 min 内用于成胶，10%柠檬酸钠溶液作用凝胶 10 min 内用于溶胶，MTT 法检测细胞存活率为 94.97% 。 该三维培养条件下的肝癌细胞 72 h 内生长状态良好，存活率可达 92.10% ，细胞堆积紧密，出现肿瘤细胞球样聚集体。结 论 本实验筛选出适合肿瘤细胞三维培养的成胶、溶胶条件。在该条件下培养肝癌细胞 SMMC-7721，细胞生长状态良好， 且细胞生长与聚集形态与传统二维培养存在差异，更接近细胞体内生存环境。基于该方法进行肿瘤细胞三维培养，可为 深入研究肿瘤细胞生长状态，为抗肿瘤药物筛选提供更有利的方式。 关键词：肿瘤细胞；SMMC-7721；三维培养；海藻酸钙 中图分类号：R965.2 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2016)10-1227-05 DOI: 10.13748/ki.issn1007-7693.2016.10.001 Research of the 3D Cell Culture Conditions Based on Human Liver Cancer Cells SMMC-7721 ZHENG Yibo1 1 1,2,3 1,2,3 1,2,3* , XU Weifeng , WANG Shuai , BAO Yongrui , MENG Xiansheng (1.College of Pharmacy, Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600, China; 2.Liaoning Multi-components Engineering Technology Research Center of Traditional Chinese Medicine, Shenyang 110032, China; 3.Liaoning Modernization Research and Engineering Laboratory of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To optimize 3D culturing conditions for the tumor cells based on human liver cancer cells SMMC-7721, find out the proper concentrations of sodium alginate and calcium chloride to form calcium alginate gel. METHODS SMMC-7721 cells