免疫学检测技术临床教学课件.ppt

3.放射免疫测定法 (RIA) 放射性核素标记抗体 敏感性较高 (pg/ml) 常用125I，131I 4.发光免疫分析 5.免疫胶体金技术 6.免疫印迹技术 marker 1 2 3 4 免疫印迹技术 (West blotting) 制作人 黄茵 * * 蛋白质芯片技术 已知抗原检测抗体 (间接法) 抗体芯片技术 已知抗体检测蛋白 (双抗体夹心法) 第三节 免疫细胞功能的检测 1. 外周血单个核细胞的分离 外周血单个核细胞 (peripheral blood monmnuclear cells，PBMC)包括淋巴细胞和单核细胞。常用的分离方法是葡聚糖-泛影葡胺(Ficoll-Urografin)密度梯度离心法。 原理：是根据外周血各种血细胞比重不同使不同密度的的细胞呈梯度分布。 一、免疫细胞的分离 流式细胞术（flow cytometry, FCM） 是一种集光学、流体力学、电力学和计算机技术于一体，借助流式细胞仪可对细胞进行多参数定量测定和综合分析的方法。 FACS：Fluorescence -activated cell sorter 制成单细胞悬液 荧光标记抗体染色（如PE-抗CD3等） 细胞单列通过流动室 激光束激发细胞产生散射光（测量区） 计算机检测分析 制成单细胞悬液 图22-4 流式细胞仪工作原理示