步骤抗Ig血按效价与融化的琼脂混合浇板凝固后打.pptVIP

第一部分 免疫球蛋白测定 一、IgG、IgA、IgM的测定 1、单向免疫扩散法（RID） 步骤：抗Ig血清按效价与融化的琼脂混合?浇板?凝固后打孔?加样?扩散?测沉淀环做标准曲线，根据标准曲线得相应Ig含量。 2、免疫比浊法： 原理：当抗原与抗体在稀释系统中反应，而比例合适时，形成的免疫复合物在聚乙二醇等作用下自液相析出，使检样的浊度或光散射程度发生改变，分为透射比浊和散射比浊。 步骤： 抗Ig＋标准血清中（含PEG）?孵育?测OD值?制标准曲线 抗Ig＋待检血清中（含PEG） ?孵育?测OD值?根据标准曲线求值 参考值：IgG：12.87±1.35g/L IgA：2.53±0.34g/L IgM：1.08±0.24g/L 临床意义： 1、低Ig血症： 先天性 — 体液免疫缺陷、联合免疫缺陷病 获得性 — 淋巴肉瘤、肾病综合征等 2、高Ig血症： 慢性感染、自身免疫病（类风湿性关节炎等） 二、IgE测定 1、血清总IgE测定：－ELISA法 方法：抗IgE包被反应板 ?IgE标准品或待测血清? 酶标记抗IgE ?底物显色? 测吸光度? 做标准曲线求待测IgE含量 参考值：男：631±128 IU/ml 女：337±60 IU/ml 临床意义： 含量增高：特应性皮肤病、枯草热、哮喘、过敏性休克等 含量降低：先天性低丙球蛋白血症等 2、变应原特异性IgE检测：放射变应原吸附试验（radioallergosorbent test,RAST) 步骤：变应原交联载体? 加待检血清或正常对照血清?加 125I-抗人IgE ? 洗去未结合125I-抗人IgE ? γ计数器测放射值 结果判定：以大于正常人3.5倍为阳性 临床意义： (1) 参见血清总IgE测定 (2) 确定变应原 三、M蛋白测定：——免疫电泳 M蛋白： 浆细胞或B淋巴细胞单克隆增殖产生的结构均一的多无活性的单克隆免疫球蛋白。 方法步骤：血清蛋白电泳?加抗体于琼脂槽内?扩 散、沉淀 结果判断：在α2-γ区附近形成致密弓形沉淀弧 临床意义：主要见于多发性骨髓瘤(multiple myeloma)，也可见于巨球蛋白血症mactoglobulinemia)、恶性淋巴瘤(malignant lymphoma)和重链病 * * 散射比浊法 *