菌糠固态发酵法培养多粘类芽孢杆菌SH15工艺.docVIP

菌糠固态发酵法培养多粘类芽孢杆菌SH15工艺 　　摘要：为提高水稻恶苗病生防菌多粘类芽孢杆菌SH15的固态发酵水平，以农业副产物――菌糠为主要培养基成分，以活菌数及芽孢数为指标，通过单因素试验及响应面试验对菌株SH15的最适工艺进行优化。结果表明，菌株SH15最适工艺：菌糠20 g、麸皮8 g、初始含水量60.75%、硫酸锰0.50%、发酵温度33.21℃、发酵时间144 h。在此条件下，发酵基质中多粘类芽孢杆菌SH15的活菌数、芽孢数、芽孢率分别为5.02×109 cfu/g、4.61×109 cfu/g、91.8%。此工艺为该菌株的工业化生产提供了一定理论依据。 　　关键词：固态发酵；菌糠；多粘类芽孢杆菌；工艺优化 　　中图分类号：S482.2+92文献标识号：A文章编号：1001-4942（2017）12-0119-07 　　Abstract Paenibacillus polymyxa SH15 is a biocontrol strain against Fusarium moniliforme. In order to improve its solid fermentation level， the optimum technology was optimized by using single factor analysis and response surface experiment. The medium was mainly mushroom bran， and the bacteria and spore yields were used as indicators. The results showed that the optimal technology for SH15 was 20 g of mushroom bran， 8 g of wheat bran，60.75% of initial water content， 0.50% of manganese sulfate， and fermented at 33.21℃for 144 hours. Under these conditions， the living bacteria number， the number of spores and spore rates in Paenibacillus polymyxa SH15 fermentation substrate were 5.02×109cfu/g， 4.61×109cfu/g and 91.8%. 　　Keywords Solid state fermentation； Mushroom bran； Paenibacillus polymyxa 　　多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）是芽孢杆菌科类芽孢杆菌属的革兰氏阳性菌，可产生多肽抗生素、拮抗蛋白、植物激素等多种生物活性物质，具有促进植物生长、提高作物产量、防治植物病害的作用。据研究表明，多粘类芽孢杆菌对辣椒疫病、番茄早疫病、西瓜枯萎病、番茄猝倒病等多种植物病害均具有良好的防治效果[1-4]，是一类极具开发前景和应用价值的促生细菌和生防细菌。现已作为微生物肥料用于农业生产，取得了良好的应用效果。目前，多粘类芽孢杆菌菌剂的生产主要采用液态深层发酵，虽然生产效率高，但设备投资大，技术要求高，后处理过程能耗高，并产生大量的废水，污染严重。而固态发酵培养基原料来源广、价格低、水耗与能耗小、无废水与废渣排放、无环境污染，作为微生物菌剂的一种清洁生产方式，日益受到重视[5，6]。 　　多粘类芽孢杆菌SH15是山东农业大学微生物工程实验室从水稻恶苗病发病田健康植株根际土壤中分离、筛选获得的一株有益芽孢杆菌。前期研究表明，菌株SH15对水稻恶苗病防效较高，且促进植株生长，目前已应用于微生物菌剂及微生物肥料制备生产中。 　　周荣华等[7]采用液态发酵法于5 t发酵罐中培养多粘类芽孢杆菌NR1，芽孢数为5×108 cfu/mL；赵国群等[8]以新鲜梨渣为主要原料于500 mL烧杯中，采用固态发酵法培养多粘类芽孢杆菌D1，芽孢数为47.8×108 cfu/g。因此，为提高水稻恶苗病生防菌多粘类芽孢杆菌SH15的发酵水平，本研究采用固态发酵法培养。一直以来，我国是世界上最大的食用菌生产国，每年产量达2 260×104 t，占世界总产量的75%以上[9]。菌糠是食用菌采收后剩余的栽培基质，随着我国食用菌种植规模扩大，菌糠的产生量日益增多[10]，是一种资源丰富的农业副产物。但目前菌糠只有少量被利用，大部分都被丢弃或焚烧，造成严重的环境污染和资源浪费[11]。菌糠富含有机质，营养丰富，除含有丰富的食用