包裹icg的靶向相变纳米粒的制备及体外实验研究-影像医学与核医学专业论文.docxVIP

重庆医科大学硕士学位论文 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 英文全称 中文全称 DiI 1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetrameth ylindocarbocyanine perchlorate DiO 3,3′-dioctadecyloxacarbocyanine 细胞膜红色荧光探针 细胞膜绿色荧光探针  perchlorate FITC Florescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 FDA Food and Drug Administration 食品药品监督管理局 ICG Indocyanine green 吲哚菁绿 MAL Maleimide 马来酰亚胺 mg Milligram 毫克 ml Milliliter 毫升 ul Microliter 微升 min Minute 分钟 s Second 秒 nm Nanometer 纳米 h Hour 小时  MJ/cm2 Millionjoule per square centimetre  毫焦耳每平方厘米 HZ hertz 赫兹 mv millivolt 毫伏 PFH Perfluorocarbon 液态氟碳 PLGA Poly(lactic-co-glycolic acid) 聚乳酸-羟基乙酸共聚 物 PBS Phosphate Buffered Saline 磷酸盐缓冲液 PVA polyvinyl alcohol 聚乙烯醇 1  SPSS Statistical Product and Service Solutions 统计产品与服务解 决方案 RGD Arg-Gly-Asp 精氨酸-甘氨酸-门 冬氨酸 r/minRevolutions per minute每分钟转速SH ℃Mercapto group Centi-degree巯基 摄氏度 2  包裹 ICG 的靶向相变纳米粒制备及体外实验研究 摘 要 第一部分 包裹 ICG 的靶向相变纳米粒的制备 目的 制备一种包裹 ICG 的靶向相变纳米粒，并观察其体外热致相 变和光致相变效果。 方法 采用多步乳化法制备包裹 ICG 及液态氟碳（PFH)的高分子纳米 粒，通过马来酰亚胺和巯基（MAL-SH)反应制备 RGD 肽靶向相变纳米粒。 在荧光显微镜下观察 FITC 标记的 RGD 肽与纳米粒的结合情况，流式细 胞术量化纳米粒与 RGD 肽结合率，加热后在倒置显微镜下实时观察包 裹 ICG 的靶向相变纳米粒的相变过程然后用脉冲激光辐照后观察纳米 粒相变情况。 结果 制备的 RGD 肽靶向高分子相变纳米粒平均粒径为（627±28.5 nm），纳米粒的 RGD 肽结合率为 98.9%。加热温度约为 70 度时，光镜下 显示纳米粒逐渐增大变为微气泡，当温度保持不变时，随着时间的增 加，所产生的气泡变大且数量增多，最后融合从开始产生气泡到最后 气泡破裂，整个过程约持续 40s。脉冲激光辐照后纳米粒发生液气相变。 结论 成功制备出携 RGD 肽的靶向相变型纳米粒，并检测了其基本性 质，为接下来体外靶向实验及显像打下良好的基础。 3  关键词：吲哚菁绿，纳米结构，液态氟碳 第二部分：包裹 ICG 的靶向相变纳米粒的体外靶向及显像实 验研究 目的 制备一种包裹吲哚菁绿 (Indocyanine green,I CG)和液态氟 碳的靶向 PLGA 纳米粒(INP)，观察其在体外光声成像及超声成像效果 及细胞靶向实验效果。 方法 制备包裹 ICG 及液态氟碳的靶向 PLGA 纳米粒。在体外增强光 声及超声显像实验中，将实验分为 3 组，包裹 ICG 和液态氟碳 PLGA 纳 米粒组（INP),只包裹液态氟碳 PLGA 纳米粒组（PNP)，双蒸水组。通 过激光辐照，采集各组的光声信息及超声信息。用乳腺癌 MD-MB231 细 胞验证其体外细胞靶向能力。 结果：成功制备包裹 ICG 及液态氟碳的靶向 PLGA 纳米粒（INP)，激 光辐照后，INP 组可采集到明显的光声信号，PNP 组和双蒸水组未采集 到光声信号。INP 组，PNP 组及双蒸水组在激光辐照之前均无明显超声 信号，激光辐照后，随着时间增加 INP 组超声信号增强后趋于稳定， PNP 组和双蒸水组无明显变化。体外靶向实验结果显示，与对照组相比， 更多的靶向纳米粒聚集在 MD-MB231 细胞周围。 结论：包裹 ICG 和液态氟碳的靶向 PLGA 纳米粒在激光辐照下可产生 4  光声信号，且能在激光辐照下发生相变使超声信号增强，并且对高表 达整合素的 MD-MB231 细胞具有较高的靶向结合能力，为其在体内光声 超声显像打下了良好的基础。 关键词：超声检查，造影剂，光声显