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血清结核杆菌特异性抗原对诊断结核病中作用探讨
血清结核杆菌特异性抗原对诊断结核病中作用探讨
摘要:目的: 从人血清提取 ESAT6、CFP10-ESAT6、ESAT6-PPE68为包被进行抗原检测,探讨结核病诊断新方法。方法: 利用本室构建并纯化的结核分枝杆菌特异性抗原蛋白 ESAT6、CFP10-ESAT6、ESAT6-PPE68,建立结核分枝杆菌特异性抗体检测的间接 ELISA 检测方法, 并与 PPD-ELISA 同时检测 220 例结核病人血清、30 例非结核呼吸疾病病人血清和 50 例健康人群血清,分别对三种方法的敏感性与特异性进行统计学分析。 结果: ESAT6-ELISA 的敏感性为 25%,特异性为 95%;CFP10-ESAT6-ELISA 的敏感性为 45%,特异性为 93%;ESAT6-PPE68-ELISA 的敏感性为 48%,特异性为 85%。 结论: 三种结核分枝杆菌特异性抗体检测方法的敏感性均低于 PPD-ELISA,但三种结核分枝杆菌特异性抗体检测方法的特异性均高于 PPD-ELISA, 其中 CFP10-ESAT6-ELISA 检测的效果最佳,PPE68 可作为结核特异性诊断的候选抗原。
关键词:结核分枝杆菌;ESAT6;CFP10;PPE68;ELISA
Abstract: Objectiv To seek new methods for detection of Mycobacterium tuberculosis by detection of ESAT6,CFP10-ESAT6,ESAT6-PPE68. Methods By employing the specific antigens of Mycobacterium tuberculosis ESAT6,CFP10-ESAT6 and ESAT6-PPE68,cloned,expressed and purified by our lab,we have established three indirect ELISA methods to detect specific antibodies of Mycobacterium tuberculosis:ESAT6-ELISA,CFP10-ESAT6-ELISA and ESAT6-PPE68-ELISA.220 patients with tuberculosis,30 patients with non-tuberculosis lung disease and 50 healthy humancontrols were analyzed simultaneously with PPD-ELISA,and the sensitivity and the specificity of the three differentmethods are evaluated.Results The sensitivity of ESAT6-ELISA is 25%,with specificity of 9%,the sensitivity of CFP10-ESAT6-ELISA is 45%,with specificity of 93%;the sensitivity of ESAT6-PPE68-ELISA is 48%,with specificityof 85%.Conclusions Compared with PPD-ELISA,the sensitivity of the three ELISA methods developed by our lab lower than that of PPD-ELISA,but the specificity of the three ELISA methods developed by our lab is higher than that of PPD-ELISA, and CFP10-ESAT6-ELISA is the best. PPE68 is a specific antigen which has crucial importancefor detection of tuberculosis.
Keywords: Mycobacterium tuberculosis;ESAT6;CFP10;PPE68;ELISA
结核病作为一种慢性传染性疾病,近年来发病率有上升趋势,临床上认为结核分枝杆菌引发呼吸道慢性传染是结核病发病的根源,由于其较高的感染率与耐药性,因此结核病的快速诊断对于结核防治有着重要的作用,但至今尚没有一种准确、快速、可靠的检测结核分枝杆菌感染的方法。结核菌素纯化蛋白衍生物(PPD)是从结核分枝杆菌培养滤液中获得的复杂蛋
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