小麦胁迫相关基因TaLEA2的克隆生物信息学及-华南农业大学学报.PDFVIP

　华南农业大学学报　２０１４，３５（５）：８８９２ ｈｔｔｐ： ｘｕｅｂａｏ．ｓｃａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ ∥ 　　　　　　　　　　 　ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｄｏｉ：１０．７６７１／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１４１１Ｘ．２０１４．０５．０１５　 龙翔宇，蒲至恩，杨丽娟，等．小麦胁迫相关基因ＴａＬＥＡ２的克隆、生物信息学及表达特性分析［Ｊ］．华南农业大学学报，２０１４，３５（５）：８８９２． 小麦胁迫相关基因ＴａＬＥＡ２的克隆、生物信息学 及表达特性分析 １ ２ ２ ２ ２ 龙翔宇 ，蒲至恩 ，杨丽娟 ，郑　科 ，刘泽厚 （１中国热带农业科学院橡胶研究所，海南儋州５７１７３７；２四川农业大学 小麦研究所，四川 成都６１１１３０） 摘要：【目的】克隆小麦Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ晚期胚胎发育丰富蛋白基因并对其进行基因结构、蛋白特性及表达模式分 析，为其耐盐性研究奠定理论基础．【方法】搜索小麦ＥＳＴ数据库，通过同源克隆分离并获得小麦晚期胚胎发育丰富 蛋白基因，用生物信息学软件分析该基因结构及蛋白特性，荧光定量试验分析该基因的表达模式．【结果和结论】获 得１条１１００ｂｐ的核苷酸序列，该序列包含了１个９８１ｂｐ的开放阅读框，编码 １个由３２６个氨基酸残基组成的蛋 白，该蛋白含有２个ＬＥＡ２结构域，属于第２组ＬＥＡ蛋白，该蛋白命名为ＴａＬＥＡ２．生物信息学分析显示ＴａＬＥＡ２蛋 白具有ＬＥＡ２家族的典型特征，富含赖氨酸（Ｌｙｓ），不含半光氨酸（Ｃｙｓ），无明显的高级结构，平均亲水系数（ＧＲＡ ＶＹ）为－０４０５，稳定系数为２５２８，这种氨基酸组成及结构均有利于蛋白的热稳定性及亲水性．实时荧光定量ＰＣＲ 分析表明，ＴａＬＥＡ２基因为组成型表达，同时该基因存在组织表达差异，且表达受不同发育时期影响；该基因调控表 达受高盐、低温、病原菌及干旱等胁迫的影响，尤其在干旱胁迫中上调表达明显，但该基因不受外源ＡＢＡ刺激的影 响．推测ＴａＬＥＡ２基因参与了小麦正常条件下的生长发育，同时也广泛地参与了小麦抵御逆境胁迫的响应，尤其在 小麦的抗旱胁迫过程中发挥重要作用． 关键词：小麦；ＴａＬＥＡ２基因；基因克隆；生物信息学；基因表达 中图分类号：Ｑ３４９．５３　　　　　　文献标志码：Ａ　　　　　文章编号：１００１４１１Ｘ（２０１４）０５００８８０５ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｌｏｎｉｎｇ，ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆＴａＬＥＡ２ｇｅｎｅｆｒｏｍｗｈｅａｔ １ ２ ２ ２ ２ ＬＯＮＧＸｉａｎｇｙｕ，ＰＵＺｈｉ′ｅｎ，ＹＡＮＧＬｉｊｕａｎ，ＺＨＥＮＧＫｅ，ＬＩＵＺｅｈｏｕ （１ＲｕｂｂｅｒＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＴｒｏｐｉｃａｌＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｄａｎｚｈｏｕ５７１７３７，Ｃｈｉｎａ； ２ＷｈｅａｔＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１１１３０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】Ｔｈｅｃｌｏｎｉｎｇ，ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆＴａＬＥＡ２ｇｅｎｅｗｅｒｅｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔｔｏｌａｙｔｈｅｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｂａｓｉｓｆｏｒｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｃｅｏｆｗｈｅａｔ．【Ｍｅｔｈｏｄ】ＴｈｅＴａＬＥＡ２ｇｅｎｅｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｂｙ ｈｏｍｏｌｏｇｙｃｌｏｎｉｎｇ．Ｉｔ