试验标准编制说明.PDFVIP

YY/T 《医疗器械与血小板相互作用试验 第2部分：体外血小板激活 试验》标准编制说明 一、工作简况 1.任务来源 根据2018年医疗器械标准制修订工作安排，由全国医疗器械生物学评价标准化技术委 员会 （SAC/TC248）归口，山东省医疗器械产品质量检验中心、四川大学负责制定 《医疗器 械与血小板相互作用试验 第2部分：体外血小板激活试验》。 2. 工作过程 在接到起草任务后，标准起草小组对国内外相关文献进行翻译和核对，结合国内血小 板激活试验的现状，在多次实验分析和验证的基础上，于2018年7 月底完成征求意见稿， 向各有关单位征求意见。 3. 预期构建的医疗器械与血小板相互作用试验标准体系 医疗器械/材料与血液接触后，会先吸附血液中的血浆蛋白 （白蛋白、γ球蛋白和纤维 蛋白原等），接着血小板发生粘附、聚集和激活，同时一系列凝血因子相继被激活，参与材 料表面的血栓形成等。与血小板相互作用的评价最常用的方法是血小板计数和激活指示剂检 测，而激活指示剂的检测主要是检测血小板颗粒释放产物 （如 -TG 、PF4 和TXB2）等， β 这些方法检测医疗器械/材料是否会引起血小板的过度消耗和/或激活，从而对病人造成危 害。高水平的血小板损耗和/或脱颗粒表明医疗器械/材料有引起出血或血栓形成并发症的风 险。血小板计数通常采用的方法是血细胞计数仪分类计数，目前对应的国外标准有 ASTM F2888-13 《血小板白细胞计数标准试验方法：心血管材料血液相容性的体外评价方 法》。而血小板颗粒释放产物/激活指示剂的测定可采用标准的酶联免疫吸附试验(ELISAs)。 综合以上考虑，现提出医疗器械血小板相互作用试验预期构建的标准体系如下： YY/T 的总标题是医疗器械与血小板相互作用试验，包括以下部分： 第1部分：体外血小板计数法； 第2部分：体外血小板激活试验。 有关其他方面的医疗器械与血小板相互作用将有其他部分的标准。 二、标准编制原则和确定标准主要内容的论据。 1. 制定本部分的主要参考文件 1 GB/T 16886.4-2003 《医疗器械生物学评价 第4 部分：与血液相互作用试验选择》 ISO 10993-4:2017 《医疗器械生物学评价 第4 部分：与血液相互作用试验选择》 2. 试验原理 医疗器械/材料与血液接触以后，如果发生血小板粘附、聚集和激活，则血小板颗粒释 放产物（如β-TG、PF4 和TxB2）可能释放入血浆中，通过测定血浆中β-TG、PF4 和TxB2 的水平，可帮助判定血小板激活的程度。TxB2、β-TG 和PF4 测定一般采用酶联免疫吸附 试验(ELISAs)，其结果一般需与空白对照和/或阴性对照相比较。 3.总体说明 3.1 背景 目前，国内外测定血小板激活的检测方法较多，但是医疗器械/生物材料对血小板激活 作用的检测可参考的标准较少。因此，有必要制定血小板激活产物测定的试验方法学标准， 为GB/T 16886.4 提供有效方法补充。ISO 10993-4：2017 中列举了常用的血小板激活试验方 法、不常用的方法以及不推荐使用的方法，其中血小板激活指标列举了血小板颗粒释放产物， 但未给出具体的试验方法。本标准按照国际标准的推荐，制定了血浆中β-TG、PF4 和TxB2 的测定方法。 4.标准中相关内容的说明 4.1 抗凝剂的选择： 目前常用的抗凝剂有乙二胺四乙酸 （EDTA）盐、肝素、草酸盐和枸橼酸盐。EDTA 盐 不影响白细胞计数及大小，对红细胞形态影响很小，可以抑制血小板聚集，不适用做血小板 功能试验。肝素可以保持红细胞的自然形态，但过量可以引起白细胞聚集和血小板减少。草 酸盐适用于血细胞比容、全血细胞计数、网织红细胞计数，不适用于血小板计数和白细胞分 类计数。枸橼酸钠用于大部分的凝血试验，对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小，可 用于血小板功能分析，故本试验选择枸橼酸钠为抗凝剂的血液。 4.2 关于试验体系中阳性对照选择的说明 ASTM F2888-2013 标准中采用的体外血小板计数方法是采用枸橼酸钠的抗凝人全血进 行的，推荐的阳性对照材料是黑橡胶和天然胶乳，要求与材料接