银杏叶提取物对非小细胞肺癌PC―9细胞增殖影响.docVIP

银杏叶提取物对非小细胞肺癌PC―9细胞增殖影响 　　摘要：目的 探讨银杏叶提取物（EGB）对非小细胞肺癌（NSCLC）PC-9细胞增殖抑制的作用机制。方法 EGB浓度设为70、105、140、210、280 mg/L，作用于体外培养的PC-9细胞24、48、72 h，MTT法检测细胞抑制率；Hoechst33258荧光染色法观察细胞核变化；ELISA检测超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量；Western blot检测Caspase-3、Caspase-9、细胞色素C（Cyt-C）及凋亡诱导因子（AIF）蛋白表达。结果 EGB作用24、48、72 h对PC-9细胞均有抑制作用，IC50分别为195.45、179.63、142.23 mg/L。105、140、210 mg/L EGB能够诱导PC-9细胞凋亡，引起细胞核固缩，形成凋亡小体，同时SOD活性增强，MDA含量降低（P0.05，P0.01， P0.001）。Western blot检测结果表明，EGB作用48 h后Caspase-3、Caspase-9、Cyt-C及AIF蛋白表达明显增强，与对照组比较差异有统计学意义（P0.05，P0.01，P0.001）。结论 EGB能够有效抑制NSCLC PC-9细胞的增殖，其机制可能是通过线粒体凋亡途径诱导PC-9细胞凋亡、抗氧化及清除自由基实现的。 　　关键词：银杏提取物；非小细胞肺癌；线粒体凋亡；自由基 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2015.05.018 　　中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2015）05-0065-04 　　Abstract：Objective To investigate the proliferation inhibitory effect and mechanism of Ginkgo Biloba extract （EGB） on non-small cell lung cancer （NSCLC） PC-9 cells. Methods Concentrations of EGB were set as 70 mg/L， 105 mg/L， 140 mg/L， 210 mg/L， and 280 mg/L， and were used to culture PC-9 cells in vitro for 24 h， 48 h， and 72 h. Tetramethylazo thiazole blue staining （MTT） method was applied to detect cell inhibition rate. Hoechst33258 fluorescent staining was employed to observe the nucleus. SOD activity and MDA content were detected by ELISA. The protein expressions of Caspase-3， Caspase-9， Cyt-C， and AIF were detected by Western blot. Results After incubated for 24 h， 48 h， and 72 h， EGB inhibited the proliferation of PC-9 cells， IC50 was 195.45 mg/L， 179.63 mg/L， 142.23 mg/L， respectively）. 105 mg/L， 140 mg/L， 210 mg/L EGB could induce apoptosis of PC-9 cells， cause the nucleus pycnosis， produce apoptotic bodies， improve SOD activity and decrease MDA content （P0.05， P0.01， P0.001）. Western blot results showed that， compared with the control group， EGB can obviously increased the protein expressions of Caspase-3， Caspase-9， Cyt-C， and AIF， with statistical significance （P0.05， P0.01， P0.001）. Conclusion EGB can effectively restrain proliferation of non-sm