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细胞分子生物学复习题 如何理解细胞是生命活动的单位？ 1.一切有机体都是由细胞组成，细胞是构成有机体的基本单位；每个细胞具有自己独立的一套完整的结构体系，构成有机体的基本结构单位。 2.细胞具有独立的、有序的自控代谢体系，细胞是代谢与功能的基本单位；在有机体一切代谢活动与执行功能的过程中，细胞呈现为一个独立的、有序的、自动控制性很强的代谢体系。 3.细胞是有机体生长与发育的基础；一切有机体的生长与发育是以细胞的增殖与分化为基础的，这是研究生物发育的基点。 4.细胞是遗传的基本单位，细胞具有遗传的全能型；每一个细胞都含有全套的遗传信息，即全套的基因，也就是说他们具有遗传的全能型。 5.没有细胞就没有完整的生命；无数实验证明，任何破坏细胞结构的完整性都不能实现细胞完整的生命活动。 真核生物与原核生物的比较（结构、功能、遗传装置方面） 结构与功能方面：原核生物除了有细胞膜外，一般没有核膜、核仁、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器。而真核细胞一般都具有全部的细胞器。原核细胞的染色体是由一个环状DNA分子构成的单个染色体，DNA不与或很少与蛋白结合。核糖体为70S。而真核生物的染色体有2个以上，由现状DNA与蛋白质结合组成。核糖体为80S。原核生物的细胞壁主要成分为氨基酸与壁酸，而动物细胞无细胞壁，植物细胞壁的主要成分为纤维素与果胶。前者细胞分裂为无丝分裂，后者以有丝分裂为主。 遗传装置方面：原核生物的DNA分子数、信息量、基因数、基因组数等相对于真核生物较少，前者的DNA分子结构为环状，后者为线状。真核生物具有大量多余的重复的DNA序列，基因中含有内含子，转录翻译后存在大分子的加工与修饰，而原核生物这些都没有。真核生物基因表达的调控比原核生物更复杂多变，转录与翻译具有严格的阶段性与区域性，原核生物的转录与翻译同时进行。 比较光学显微镜和电子显微镜的特点。 分辨本领 光源 透镜 真空 成像原理 光学显微镜 200nm 可见光 玻璃透镜 不要求 利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化 100nm 紫外光 玻璃透镜 不要求 电子显微镜 接近0.1nm 电子束 电磁透镜 1.33*10-5-1.33*10-3Pa 利用样品对电子的散射和投射形成明暗反差 什么是细胞工程？列举三个例子说明细胞工程操作的原理。 细胞工程：是在细胞水平上的生物工程。是指对细胞进行大规模培养，或在细胞水平上改良生物的遗传品质以满足人类特定需要的技术。 1.细胞融合技术：两个或多个细胞融合成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合。动物细胞融合一般要用灭活的病毒或化学物质介导，植物细胞融合时要先用纤维素酶去掉纤维素壁。细胞融合可以在基因型相同的细胞间进行，也可以在基因型不同的种内细胞间甚至种间细胞间进行。 2.单克隆抗体技术：是指将骨髓瘤细胞与经免疫的小鼠B淋巴细胞在聚乙二醇或灭活的病毒的介导下发生融合。融合后的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，一能分泌抗体，二能无限繁殖，从而分泌单克隆抗体。 3.细胞拆合技术：细胞拆合是指将核与质分离开来，然后把不同来源的细胞质和细胞核相互配合，形成核质杂交细胞。可以分为物理法和化学法两种。 以克隆绵羊多利的培育过程为例，说明其中涉及到那些分子细胞生物学原理和技术。 涉及到细胞培养、核移植、细胞同步化以及蛋白的翻译与加工等原理和技术。 细胞培养：细胞培养包括微生物细胞的培养和细胞培养技术。由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术必不可少的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。 核移植：所谓细胞核移植技术，就是将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新个体，使得核供体的基因得到完全复制。 获得供体核→获得受体细胞并去核→核卵重组→细胞融合/激活→培养重构胚 细胞同步化：在一般培养条件下，群体中的细胞处于不同的 HYPERLINK /view/254458.htm \t _blank 细胞周期时相之中，为了研究某一时期细胞的代谢、增殖、基因表达等，常采取一些方法使细胞处于细胞周期的同一时相，这就是细胞同步化技术。选用DNA合成抑制剂可逆地抑制S期细胞DNA合成而不影响其他细胞周期运转，最终可将细胞群体阻断在G1／S期交界处；一些抑制微管聚合的药物，因抑制有丝分裂装置的形成和功能行使，可将细胞阻断在有丝分裂中期，使细胞同步于M期。M期同步：一般有振荡收集法、秋水仙胺阻抑法、N2阻断法 S期同步法一般采用胸腺嘧啶核苷(TdR)双阻断法：该法利用过量TdR能阻碍DNA合成的原理而设计，为了加强细胞同步化效果，常采用两次TdR阻断法，即双阻断法。第1次阻断时间相当于G2、M和G1期时间的总和或稍长，释放时间不短于S期时间，而小于G2+M+G1期时间，这样