槐米中芸香苷提取分离及检识.pptxVIP

实验原理：1.芸香苷分子中含具有酚羟基，能与碱成盐而溶于碱液中，加酸酸化后又可沉淀析出，可用碱溶酸沉法提取芸香苷。2.在热水中溶解度大, 冷水中溶解度小，采用沸水提取法。芸香苷的精制可根据其在冷、热水（或冷、热乙醇）中溶解度相差悬殊的性质进行。3.芸香苷可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，并可通过色谱及化学反应鉴定。冷热溶解度差别大，可在酸水中发生水解。含有糖，极性大。冷、热水中均不溶解，不含有糖，极性小于芸香苷。芸香苷的提取 称取槐米粗粉20g（压碎），置于500ml烧杯中，加0.4%硼砂水溶液200ml，在搅拌下加入石灰乳调至pH8～9，加热微沸30min，随时补充失去的水分和保持pH8～9，趁热用棉花滤过，残渣加150ml0.4%硼砂水溶液同法操作再提取20min，合并两次滤液，用浓盐酸调pH3～4，搅拌，静置过夜（沉淀下来的是什么？）。芸香苷的精制 将上次实验静置液减压抽滤，在60～70℃烘干，得粗品芸香苷，称重，计算得率。将粗制芸香苷悬浮于300ml蒸馏水中，煮沸至芸香苷全部溶解，趁热抽滤，滤液放冷析晶。芸香苷冷热溶解度差别大芸香苷的水解将上次实验所得溶液抽滤，在60～70℃烘干，得精制芸香苷。取精制芸香苷1g，置250ml圆底烧瓶中，加入2%硫酸80ml，加几粒沸石，加热回流1h，瓶中浑浊液逐渐变为澄清的棕黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀（为什么出现如此现象？）。放冷，抽滤，丢弃滤液（应为澄清无色液体），沉淀物为芸香苷苷元（槲皮素），用蒸馏水洗至中性，抽干水分，烘干，称重。得槲皮素。芸香苷槲皮素芸香苷鼠李糖葡萄糖芸香苷的水解槲皮素将上次实验所得溶液抽滤，在60～70℃烘干，得精制芸香苷。取精制芸香苷1g，置250ml圆底烧瓶中，加入2%硫酸80ml，加几粒沸石，加热回流1h，瓶中浑浊液逐渐变为澄清的棕黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀。放冷，抽滤，丢弃滤液（应为澄清无色液体），沉淀物为芸香苷苷元（槲皮素），用蒸馏水洗至中性，抽干水分，烘干，称重。得槲皮素。葡萄糖和鼠李糖芸香苷槲皮素鼠李糖葡萄糖芸香苷和槲皮素的检识色谱检识：聚酰胺色谱化学检识1.盐酸-镁粉反应：黄酮 2.三氯化铝反应 ：黄酮3.三氯化铁反应：酚羟基4. Molisch反应：糖、苷类 芸香苷和槲皮素的色谱检识样品： 自制1%芸香苷乙醇溶液 自制1%槲皮素乙醇溶液对照品：1%芸香苷对照品乙醇溶液 1%槲皮素对照品乙醇溶液色谱方法：聚酰胺色谱 展开剂：乙醇 : 水 : 乙酸乙酯（3:1:0.5）约4ml，上行展开。 展距：6cm。显色剂：①在可见光下观察斑点颜色，再在紫外灯下观察斑点颜色。 ②用氨水熏，记录斑点颜色和位置。结果：记录图谱，斑点颜色，并计算芸香苷和槲皮素的Rf值。 聚酰胺色谱法是利用作为固定相的聚酰胺分子内存在的许多酰胺基，能与酚类的羟基、酸类的羧基及醌类的醌基形成氢键而产生吸附，是混合物中各成分得到相互分离的方法。聚酰胺与各种化合物形成氢键的能力不同，决定了聚酰胺对其吸附力的强弱。形成氢键的能力首先与溶剂的种类有关，在水中最强，在有机溶剂中较弱，在碱性溶剂中最弱。在聚酰胺色谱中常用作洗脱剂的各种洗脱能力顺序如下： 水 甲醇或乙醇 丙酮 稀氢氧化钠溶液或稀氨溶液 甲酰胺或二甲基甲酰胺 尿素水溶液与在含水溶剂中，化合物分子结构对氢键缔合的影响有关，大致如下：化合物分子中能形成氢键的基团数目越多，被聚酰胺吸附越强。形成氢键的基团所处位置不同，被吸附的强度也不同。分子中芳香核、共轭双键越多，被吸附强度越大。化合物若能形成分子内氢键，则被吸附强度减小。薄层色谱play