项目名称丹参桃仁郁金协同用药对铅中毒小鼠驱铅效应及拮抗氧化.DOCVIP

湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划 项　 目　 申　 报　 表 项目名称: 地龙蜂蜜浸液对鼠体表溃疡模型创面愈合及氧化应激反应调节作用的实验研究 学校名称 怀化医学高等专科学校 学生姓名 学 号 专 业 性 别 入 学 年 份 王馨悦 2012040102 药学 女 2012年 周娟 2012040418 药学 女 2012年 刘韵 2013040306 药学 男 2013年 邓桂升 2013040404 药学 男 2013年 汤婷婷 2013040509 药学 女 2013年 指导教师 龚明 职称 讲师 学科专业 中药学 曹春芽 职称 讲师 学科专业 药理学 学生曾经参与科研的情况 课题组学生参与了药学系组织的第二课堂学生课外兴趣小组，主要参与了省教育厅科研课题 “筋骨草属三种易混近缘品种活性成分的色谱分析研究”和怀化市科技局科研项目“环保霉素A对氧化应激后大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响研究”的部分实验内容，不同层次的科研参与给予了学生更多接触科研工作的机会，使学生受到了小型科研技能和智能训练，提高了学生的动手能力和实验兴趣。 指导教师承担科研课题情况 龚明 医学硕士，自2003年至今主要从事药学专业课程教学及科研工作，主持并参与多项不同层次的科研课题研究。2013年主持湖南省教育厅科研课题“筋骨草属三种易混近缘品种活性成分的色谱分析研究”，2009年参与广东省科技计划项目“独脚金的质量标准化研究”，2012年参与湖南省教育厅科研课题“复方烟酸辛伐他汀缓释微丸胶囊的制剂工艺研究”。 曹春芽 医学硕士，自2007年至今主要从事药理学专业课程教学及科研工作，主持并参与多项不同层次的科研课题研究。2013年主持怀化市科技局课题“环孢霉素A对氧化应激后大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的研究”，2009年参与省教育厅课题“醛糖还原酶在高血压心血管重塑中的作用及其与血管紧张素Ⅱ的关系”、2012年参与省教育厅课题“基于CIC-3氯通道靶标的化疗耐药机制的研究”，2013年参与省中医药管理局课题“血藤果治疗围绝经期综合征的机制研究”。 项目研究和实验的目的、内容和要解决的主要问题 1.研究目的 ①验证地龙蜂蜜浸液对体表溃疡的治疗效果； ②观察地龙蜂蜜浸液联合庆大霉素、α-糜蛋白酶治疗体表溃疡的作用； ③初步阐明地龙蜂蜜浸液治疗体表溃疡的作用机制。 2.研究内容 2.1制备药物: ①地龙蜂蜜浸液1组：取新鲜地龙40g，洗去泥土，置清水内，加3~5滴植物油，让地龙吐出腹中泥土，1小时后再用0.9 %NS反复冲洗2~3次，然后将地龙放置于干净杯子内，加入蜂蜜40ml，地龙脱水干瘪。用注射器抽取上清液30ml，再加入庆大霉素注射液16万U，α-糜蛋白酶5mg即成，备用。 ②地龙蜂蜜浸液2组：取新鲜地龙40 g，洗去泥土，置清水内，加3~5滴植 物油，让地龙吐出腹中泥土，1小时后再用0.9 %NS反复冲洗2~3次，然后将地龙放置于干净杯子内，加入蜂蜜40 ml，地龙脱水干瘪。用注射器抽取上清液30 ml，备用。 ③阳性对照药物：庆大霉素注射液16万U，α-糜蛋白酶5 mg溶于30 ml蒸 馏水中备用。 2.2观察地龙蜂蜜浸液对金黄色葡萄球菌感染体表溃疡大鼠模型的作用 2.2.1建立金黄色葡萄球菌感染体表溃疡模型 用10%水合氯醛按剂量（4ml/kg）腹腔注射麻醉大鼠，将麻醉后的大鼠俯卧于手术固定板，用8%硫化钠脱去背部毛，碘伏局部消毒后，用刀片切除皮肤浅层约2cm*2cm十字口子，深达皮下，创口内注1ml/5亿金黄色葡萄球菌液，不缝合，自然暴露24 h后，伤口周围出现红、肿、皮温升高，轻触痛叫。创口周围出现脓性泌物，做组织病理切片显示组织坏死结构不清，表面为炎性渗出物及坏死物覆盖，皮肤附属器消失，溃疡深达肌层。溃疡底部胶原纤维中纤维母细胞见有轻度增生，血管内皮细胞肿胀增生，大量淋巴、浆细胞及嗜酸性、中性粒细胞浸润，确定模型建立。 2.2.2分组处理 参照文献[1],取SD大鼠随机分为分为5组，每组10只。即正常对照组、模型对照组、阳性对照药物组、地龙蜂蜜浸液1组、地龙蜂蜜浸液2组。每只大鼠分笼饲养，自由进食进水。正常组、模型组两组在脱毛部位用一定量的生理盐水涂擦，每天2次，其他组分别用相对应的药进行治疗，每天2次。 2.2.3检测指标 ①一般观察：每天详细观察大鼠的鼠尾颜色、活动度、皮毛颜色、精神状态、是否闭目、脓肿颜色、脓肿气味并进行记录；测量大鼠愈合时间：从开始给药第一天算起，记录各组大鼠疮面愈合的时间。 ②检测大鼠血清中的LSZ、EGF、VEGF的含量 给药14 d后,取材前禁饮食24 h，采用水合氯醛腹腔麻醉，麻醉成功后，腹部正中切口，仔细分离腹主动脉，常规腹主动脉采血，血液凝固后置于3