循环肿瘤标志物ctc检测技术在肺部小结节诊断中进展-培训课件.pptVIP

reduction in subjects needed to be followed up 减少需要跟进的科目 Decrease false positive rate of ct scans (扫描） Biomarker 分子标记物或者肿瘤标志物，能够帮我们更精准的判断这个患者应该做什么样的治疗，降低胸部CT的假阳性率，减少需要随访的或者需要手术的患者。接下来我想跟各位老师分享的就是这个Biomarker是个什么东西。 * 这个Biomarker就是CTC，因为CTC是肿瘤细胞的个数表达的。 * CTC是可以反映肿瘤长的快还是长的慢的，或者肿瘤的活性成分是怎么样的？ * 基础实验来证实早期肿瘤可以检测到CTC 乳腺癌小鼠 * 叶酸受体作为靶点的，这个CTC可能更为直观， 然后把小鼠解剖了，发现在4周以内没有发现任何转移癌的迹象，也就是在肿瘤相对早期的时候，无法判断是否是肿瘤的时候的确在血液里可以找到循环肿瘤细胞 * * * 首先我们使用的PCR的方法 可以放大10 12次方倍，跟市面上的荧光相比，我们的方法非常的敏感 * 这个就是我们检测的整个流程，拿CD45作为探针把白细胞去除，最后剩下肿瘤细胞和白细胞，我们用探针去标记肿瘤细胞，标记完了以后我们把后面的DNA切除下来，通过DNA的扩增来分析CTC的含量，所以我们最终能够从1比600万 * 我们从4个方面来评价我们的特点 * * 首先我们使用的PCR的方法 可以放大10 12次方倍，跟市面上的荧光相比，我们的方法非常的敏感 * 我们可以在120万个有核细胞中检测出1个CTC 益善是25亿个细胞里看到1个CTC,其实这个是非常违反科学常识的，因为目前在血液里如果你把红细胞算上，那差不多是上亿个的，但是红细胞是无核细胞，他没有细胞核，白细胞是有细胞核，真正干扰的是白细胞，有核细胞.真正干扰的是有核细胞，无核细胞几乎是没有什么干扰的。因为一做核染色的，红细胞是不会现象的。 * 1比600万 而且我们的回收效率是非常高的 * 20个已知阳性细胞 参入3ML血里面，灰色是我们按照正规实验来做，白色的是 理论上如果是阴性说明这个探针就是特异性的结合叶酸受体，是阳性说明不是特异性结合CTC还会和其他的物质结合。 * * 爱普 * * 可视化适合做科研，不是适合做临床应用 * 12个患者大部分患者的重复性是相当好的 基本都是在同一个范围的range里面，武汉协和和武汉同济。 同一个范围RANGE里的 * 3ML血 我们是一管3ML血，其他的第一管都是需要扔掉的 * 这是目前为止市面上所有检测CTC的技术，我们的敏感性是最高的，基于敏感性高，我们只需要3ML血（并且是一管3ML血），其他的看起来是5ML血，但是他们抽患者第一管血是丢掉的，他们其实是两管血，抽了两管血，扔掉一管，留下一管。我们只抽一管血直接用来检测。我们的敏感性是最高的，我们报告时间最快的 6小时，每次12个样本也是最快的 * * * 1期肺癌是指3CM以下的 * 我们把3CM以下的再进一步，1CM以下的肺癌，这个在所以目前的检测技术手段是没有的敏感性 假阳性是12% 这个绝对是有质的区别的。 * * * 1.我们的应用场景是肺部发现小结节怀疑是肺癌的时候。 2.我们是敏感性最高的血清学标志物，我们一期的敏感度可以达到67%，特异性达到88% 3.我们是胸部CT的黄金搭档，能够帮助患者更好的了解肿瘤发生，发展的状况。 * 2004 Cell Search: 乳腺癌中检测出，但肺癌敏感性低 2011 Cell Research: 采用的抗体(EpCAM)对EMT细胞特异性差，而肺癌细胞转移入血需要EMT的过程 EpCAM阴性细胞中，存在大量CTC Cell Research系统主要使用EpCAM（上皮粘附分子）做为探针 研究证实，EpCAM阴性的细胞中也存在CTC Jiatao Lou, et al. Plos One 2013 有报道，部分激活的巨噬细胞存在FR的高表达1 临床前研究证实，这部分巨噬细胞很少在正常人的外周血中出现2 使用抗CD14免疫磁珠去除巨噬细胞后，CTC的检测结果无明显改变3 1、He W, et al. Int J Cancer 2008; 2、He W, et al. Proc Natl Acad Sci, 2007; 3、Jiatao Lou, et al. Plos One 2013 CytoploRare? FR靶向PCR CTC检测技术巨噬细胞（可能存在FR表达）不影响检测结果 CytoploRare? 敏感性 特异性 可重复性 临床应用便捷性 CytoploRare? FR靶向PCR CTC检测技术同一患者重复检测，可重复性高 CytoploRare? 敏感性