膜片钳芯片技术及其在细胞电生理分析中的研究进展-国家自然科学.PDF

自然科学进展 　第17 卷　第12 期　2007 年12 月 1601 ＊专题评述 ＊ 膜片钳芯片技术及其在细胞电生理 分析中的研究进展＊ 1 1 1 1 ＊＊ 2 2 陈培华 　张　威 　周　俊 　王　平 　肖丽丹 　杨　莫 1.浙江大学 生物传感器国家专业实验室, 生物医学工程教育 重点实验室, 生物医学工程与仪器科学学院, 杭州 310027; 2.香港理工大学 医疗科技及资讯学系, 香港 摘要　　膜片钳芯片技术是继细胞芯片之后的又 一种崭 的分析细胞电生理参数的芯片技术.由 于该芯片除了具有传统膜片钳的高分辨和高准确性特点外, 还具有高通量、 自动化以及细胞多通 道参数和细胞网络参数在线和实时检测等优点.因此, 该芯片技术将大大促进细胞离子通道、 细 胞网络传导以及药物筛选的研究和应用.文中具体介绍了膜片钳芯片技术的发展及其应用, 结合 作者的研究工作, 着重介绍了膜片钳芯片技术在味觉细胞研究的最 进展, 并结合神经芯片研究 细胞网络的方法, 对采用膜片钳芯片技术在细胞和分子水平上研究味觉的敏感机理和传导机制的 应用前景进行了展望. 关键词　　　　　　 　　经典膜片钳技术由于信息含量大、 分辨率高, 神经, 经编码最终传达到大脑. 已成为目前研究细胞电生理的 “金标准”, 但是通 本文详细叙述了国际上膜片钳芯片技术的发展 量低、 操作烦琐、 实验条件要求高等缺点限制了它 及其在离子通道中的研究和药物筛选中的应用, 评 在细胞生理和药物发现等研究中的应用, 由此膜片 述了膜片钳芯片和味觉电生理、 味觉传导的最新研 钳芯片技术应运而生.它能够进行高通量的电生理 究进展, 对膜片钳芯片在味觉细胞电生理和味觉传 测量、 自动形成高阻抗封接, 并能与光学测量手段 导研究中的应用前景进行了展望. 相结合, 将促进离子通道和高通量药物筛选的研 1 　 典膜片钳技术 究. 由于味觉系统自身的复杂性, 人们对它的研究 经典的膜片钳技术是采用细胞贴附式对激活的 一直落后于其他感受系统.目前膜片钳、 微电极、 通道电流进行记录.基本原理是将微电极尖端所吸 细胞分子生物学、 微电子芯片技术、 行为学等手段 附的细胞膜电位固定, 对通过通道的微小离子电流 的应用, 使得味觉研究取得了较大的进展.在细胞 作动态或静态观察, 从而研究其功能.膜片钳技术 水平上, 较多的是对单个味细胞的电生理进行研 实现的关键是使玻璃微电极尖端的边缘与细胞膜之 究.最近研究发现味蕾中味觉细胞之间存在着通信, 间形成高阻抗封接, 阻抗可达 10—100 G Ψ.此时, 它们所构成的细胞网络使得味觉信息被传递到输入 玻璃微电极和细胞膜间的距离小于1 nm , 使得吸附 　2007-04-01 收稿, 2007-06-15 收修改稿 　 ＊国家自然科学基金(批准号、 浙江省人才基金(批准号:R205502)和浙江大学与香港理工大学合作研究基金资助 　＊＊通信作者, E-mail :cnpw ang @zju.edu.cn 1602 自然科学进展 　第17 卷　第12 期　2007 年12 月 的膜片与其周围在电学上隔离, 原理如图1 所示. 置于细胞上.最近 Fly ion 公司提出翻转膜片钳 [ 1] (flip-t ip)技术 .他们设计的Fly sc een 8500 系统 是一种创新的自动化膜片钳系统.将细胞/电极界面