第一章 蛋白质化学基本知识.ppt

蛋白质化学的课时安排 理论课24课时，12次，分布在1～15周。 实验课8课时，2个实验。（邵老师） 考试第17周，2课时。 合计：34课时。 蛋白质化学的基本知识 基本知识提问： 常见20种氨基酸的情况：分类、中文名、三字符、一字符、等电点等。 2. 多肽、蛋白质定性和定量分析的依据？ 3. 多肽、蛋白质的结构及检测方法？ 一、什么是蛋白质? 蛋白质(protein)是由许多氨基酸(amino acids)通过肽键(peptide bond)相连形成的高分子含氮化合物。 二、蛋白质的生物学重要性 1. 蛋白质是生物体重要组成成分 分布广：所有器官、组织都含有蛋白质；细胞的各个部分都含有蛋白质。 含量高：蛋白质是细胞内最丰富的有机分子，占人体干重的45％，某些组织含量更高，例如脾、肺及横纹肌等高达80％。 三 蛋白质的分类 蛋 白 质 的 化学 组 成The Molecular Component of Protein 蛋白质元素组成的特点 由于体内的含氮物质以蛋白质为主，因此，只要测定生物样品中的含氮量，就可以根据以下公式推算出蛋白质的大致含量： 二、氨基酸（Amino Acid) 存在于自然界中的氨基酸有300余种，但组成人体蛋白质的氨基酸仅有20种，且均属L-α-氨基酸（甘氨酸除外）。 （二）氨基酸的分类 根据侧链的结构和理化性质可分为四类： 非极性疏水性氨基酸 极性中性氨基酸 酸性氨基酸 碱性氨基酸 侧链含烃链的非极性疏水性氨基酸 甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸； 根据侧链结构，丙氨酸侧链的疏水性最小； 甘氨酸侧链介于极性与非极性之间 2.侧链有极性但不带电荷的极性中性氨基酸 色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺 半胱氨酸侧链的巯基失去质子的倾向较其它氨基酸大，极性最强 天冬氨酸 谷氨酸 侧链均含有羧基，可解离带负电荷 赖氨酸 精氨酸 组氨酸 分别含 氨基 胍基 咪唑基 可质子化带正电荷 （第2次课） 4.α-氨基参与多种化学反应 氨基酸的α-氨基的一个氢原子可被2，4二硝基氟苯（DNFB)取代，产生二硝基苯基氨基酸，可用于鉴定蛋白质N-末端氨基酸 二、肽 （二） 几种生物活性肽 1.谷胱甘肽(glutathione,GSH) ：GSH的巯基具有还原性，可作为体内重要的还原剂保护体内蛋白质和酶分子免遭氧化，使蛋白质和酶处在活性状态。 蛋 白 质 的 分 子 结 构The Molecular Structure of Protein 钙离子结合蛋白 三 、蛋白质的三级结构 (tertiary structure) 结构域(domain)在空间上相对独立 　定义：　 　　　有些蛋白质被合成以后，自己不能独立形成自由能最低的立体结构，而需要一类蛋白质来帮助折叠，这类蛋白质称为分子伴侣。它们普遍存在于真核生物和原核生物中，一般使用ATP的能量帮助其它蛋白质形成自由能最低的空间构象。 肌红蛋白 血红蛋白 （二）血红蛋白的构象变化与结合氧 Hb与Mb一样能可逆地与O2结合， Hb与O2结合后称为氧合Hb。氧合Hb占总Hb的百分数（称百分饱和度）随O2浓度变化而改变。 1 协同效应(cooperativity) 定义：一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后，能影响此寡聚体中另一个亚基与配体结合能力的现象，称为协同效应。 如果是促进作用则称为正协同效应 (positive cooperativity) 如果是抑制作用则称为负协同效应 (negative cooperativity) 定义：别构效应亦称变构效应，是指一个蛋白质与它的配体结合后，蛋白质的构象发生变化,使它更适合于功能的需要，这一类变化称为别构效应。 蛋白质的等电点（pI） 概念：当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。 pI是蛋白质的特征性常数。 pH pI，带负电荷； pH pI带正电荷。体内多数蛋白pI为5.0左右 ， 在人体体液为pH7.45环境下，多数蛋白带负电荷。 利用蛋白质两性电离的性质，可通过电泳、离子交换层析、等电聚焦等技术分离蛋白质。 盐析法 原理：是将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液，使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏，导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素被去除沉淀。 优点：沉淀的蛋白质保持着它的天然构象，能再 溶解。 有机溶剂分级分离法 原理：是将有机溶剂（丙酮、乙醇)加入蛋白质溶液中，导致溶液介电常数降低，增加了相反