Fis对伤寒沙门菌基因表达的系统调节作用-江苏大学.PDF

( ) 第 20卷第 1期 江 苏 大 学 学 报 医 学 版 Vol. 20 No. 1 2010年 1月 　 ( ) 　 J an. 20 10 Jou rnal of J iangsu U n iversity M edicine Edition 　 　 　 　 　 　 Fis对伤寒沙门菌基因表达的系统调节作用 1 2 1 1 1 2 1 李安平 ,谢新民 ,茅凌翔 ,杜 　鸿 ,王 　敏 ,罗 　哲 ,黄新祥 (江苏大学 1. 基础医学与医学技术学院生物化学研究室 ; 2. 生命科学研究院 ,江苏 镇江 2 120 13) [摘 　要 ] 　目的: 探讨伤寒沙门菌调节因子 fis对基因表达的系统调节作用 。方法 : 用 自杀质粒介导的同源重组方 法制备伤寒沙门菌 f is基因缺陷变异株 ,用脉冲场凝胶电泳分析 f is缺陷变异株的基因组结构 。利用伤寒沙门菌全基 因组 DNA 芯片分析技术 , 比较伤寒沙门菌野生株和 f is基因缺陷变异株的基因表达谱差异 。用重组载体 pBADf is 回 补 f is缺陷变异株 ,选择部分差异表达基因进行 qR TPCR 验证 ,用半固体平板培养观察野生株 、f is缺陷变异株和回补 株的动力 。结果 : f is基因缺陷变异株含有二相鞭毛素编码基因的线性质粒缺失 ,且动力消失 ;基因表达谱比较分析结 果表明 ,伤寒沙门菌 f is基因缺陷变异株在对数生长期 94个基因出现表达差异 ; qR TPCR 分析所选基因表达的结果与 芯片分析结果相符 ;f is缺陷变异株在回补 f is基因后 ,动力及差异表达基因都获得明显恢复 。结论 : F is在伤寒沙门菌 中对动力 、侵袭及多种代谢相关基因的表达发挥重要调节作用 。 [关键词 ] 　伤寒沙门菌 ; F is; 基因芯片 ; 脉冲场凝胶电泳 ; 基因表达调节 [中图分类号 ] 　R378. 2　　[文献标志码 ] 　A 　　[文章编号 ] 　167 1 - 7783 (20 10) 0 1 - 0010 - 07 Sy stem ic regula tion of F is on gene expression in Sa lm on e lla en ter ica serovar Typh i 1 2 1 1 1 2 1 L I A n p ing , X IE X in m in , MA O L ing x iang , D U H ong , WAN G M in , L UO Z