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生化需氧量BOD5的测定 水体发生生化反应必须具备3个条件: 好氧微生物 足够的溶解氧 能被微生物利用的营养物质 定义 生化需氧量(BOD):在规定条件下,水中有机物和无机物在生物氧化作用下所消耗的溶解氧(以质量浓度表示)。 (20±1)℃、5d培养 生化反应的两个过程: 第一阶段:碳化阶段,有机物中的C和H氧化成CO2,H2O。 20℃, 20d 第二阶段:硝化阶段,含氮化合物及部分氨氧化成亚硝酸盐和硝酸盐。 20℃, 100d 一般测定水样BOD5时,硝化作用不显著或根本不发生硝化反应。 有机物质分解的两个阶段 测试方法 Ⅰ.稀释与接种法 Ⅱ.微生物传感器快速测定法 Ⅲ.空气压差法 不经稀释的水样——将水样注满培养瓶,塞好后应不透气。将瓶置于恒温条件下培养5天。培养前后分别测定溶解氧浓度,由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量,即BOD5值。 经稀释的水样——由于多数水样中含有较多的需氧物质,其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧(DO)量,因此在培养前需对水样进行稀释,使培养后剩余的溶解氧(DO)符合规定。 一、方法原理 Ⅰ稀释与接种法 GB7488-87 应使培养中所消耗的溶解氧大于2mg/L,而剩余的溶解氧在1mg/L以上 本方法适用于BOD5大于或等于2mg/L并且不超过6000mg/L的水样。 BOD5大于6000mg/L的水样仍可用本方法,但由于稀释会造成误差,有必要要求对测定结果做慎重的说明。 二、适用范围 三、样品的采集 采样容器:溶解氧瓶 样品需充满并密封于瓶中,置于0~4℃保存到进行分析时。 一般应在采样后6h之内进行检验。在任何情况下贮存皆不得超过12h 。 四、试剂 分析时,只采用公认的分析纯试剂 蒸馏水或同等纯度的水(在全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水) 蒸馏水中含铜不应高于0.01mg/L,并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。 1.盐溶液 下述溶液至少可稳定一个月,应贮存在玻璃瓶内,置于暗处。 一旦发现有生物滋长迹象,则应弃去不用。 (1)磷酸盐缓冲溶液:pH应为7.2。 (2)硫酸镁溶液:22.5g/L (3)氯化钙溶液:27.5g/L (4)氯化铁(Ⅲ)溶液:0.25g/L 2.接种水 如试验样品本身不含有足够的合适性微生物,应采用下述方法之一,以获得接种水: (1)城市污水 (2)表层土壤浸出液 (3)含有城市污水的河水或湖水。 (4)污水处理厂出水。 (5) 对于某些不易被微生物分解的有机废水,可在排放口下游约3~8km处取水,或选用经实验室驯养的水做接种水。 3.稀释水 取前述每种盐溶液各1mL,加入约500mL水中,稀释至1000mL后混匀。此溶液应在8h内使用。 稀释水中溶解氧浓度要求8~9mg/L。 此溶液的pH=7.2 BOD5应小于0.2mg/L。 4.接种稀释水 每升稀释水中加入接种水的量: 生活污水1~10mL, 表层土壤浸出液20~30mL, 河水或湖水10~100mL. 此溶液的pH=7.2;立即使用 BOD5应以在0.3-1.0mg/L为宜。 5.盐酸(HCl)溶液:0.5mol/L。 6.氢氧化钠(NaOH)溶液:20g/L。 7.亚硫酸钠(1/2Na2SO3)溶液:1.575g/L,此溶液不稳定,需每天配制 8.葡萄糖-谷氨酸标准溶液此溶液于临用前配制。为了检验接种稀释水、接种水和分析人员的技术,需进行验证试验。 五、仪器 1.培养瓶:细口瓶的容量在250~300mL之间,带有磨口玻璃塞,并具有供水封用的钟形口,最好是直肩的。 2.恒温培养箱:能控制在20±1℃。 3.测定溶解氧仪器。 4.用于样品运输和贮藏的冷藏手段(0~4℃)。 5.稀释容器:带塞玻璃瓶,刻度精确到毫升,其容积大小取决于使用稀释样品的体积。 使用的玻璃器皿要认真清洗,不能吸有毒的或生物可降解的化合物,并防止沾污。 六、操作步骤 (一)样品预处理 1.样品的中和如果样品的pH不在6~8之间,可用盐酸或氢氧化钠溶液调节pH近于7,但用量不超过水样体积的0.5%。 2.含游离氯或结合氯的样品含少量的放置1~2h, 加入亚硫酸钠溶液(取已中和的水样100mL加入1+1乙酸10mL,10%碘化钾溶液1mL,混匀,以淀粉为指示剂,用亚硫酸钠滴定游离碘。由亚硫酸钠消耗的体积,计算水样应加的量。) 3.水样含铜、铅、锌、铬、镉、砷、氰等有毒物质,使用经驯化的接种水进行稀释,或提高稀释倍数以减少毒物的浓度。 4.DO过饱和和不足 DO过饱和——将试验样品温度升至约20℃,然后在半充满的容器内摇动样品,以便消除可能存在
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