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第三章 细胞的代谢 第三节 酶1 第三章 细胞的代谢 第三节 酶* 实验1：大肠杆菌的培养和分离 按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 液体培养基 固体培养基 凝固剂 琼脂 扩大培养，工业生产 分离纯化，鉴定菌种，计数，保藏 选择培养基 鉴定培养基 天然培养基 合成培养基 消毒：较为温和的方法，如酒精 注：消毒不能杀死芽孢 灭菌：强烈，所有，完全无菌 灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃下煮15min（牛奶） 3、化学药剂消毒法:用70%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒（空气） (1)常用消毒的方法： 紫外灯，过滤风，酒精灯，酒精棉球 在火焰旁右手3指拿锥形瓶，2指拿封口膜 使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰 左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖 待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置 从大肠杆菌斜面→锥形瓶中的液体培养基 接种好后在37度摇床振荡培养12h 工具：接种环在接种前要灭菌 分离方法：平板划线分离法 原理：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。 只能蘸一次、再次划线从上次末端开始、划好倒置培养1-2天、划线末端出现不连续的单个菌落 灼烧接种环 冷却 划线 （第一区域） 蘸取菌液 灼烧接种环 冷却 划线 （第二区域） 灼烧接种环 冷却 划线 （第三区域） 灼烧接种环 冷却 划线 （第四区域） 灼烧接种环 冷却 划线 （第五区域） 灼烧接种环 平板倒置放置培养
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