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理化因素对微生物的影响;一、实验目的
1、掌握细菌常用的接种方法和在不同培养基上的生长现象,细菌的三种特殊结构。
2、熟悉常用人工培养基的种类,实验室常用消毒和灭菌设备的原理及使用方法。
3、了解常用人工培养基的制备方法、细菌在自然界和人体的分布特点。;二、实验内容;(一)示教:细菌的特殊结构;产气荚膜梭菌荚膜(荚膜染色法);;破伤风梭菌芽胞(芽胞染色法)
;破伤风梭菌芽胞(芽胞染色法);(二)培养基;;2.细菌的培养技术及生长现象
(1)液体培养基接种法及生长现象;液体培养基中;;(2)固体培养基接种法:
①平行划线法:
左手斜持平板底,右手持接种环。接种环在火焰上灭菌,冷却后,沾取菌种,左手拿平板略打开,先在平板的一端涂开,然后由此开始向下平行密集划线,约占平板的一半。将平板转180°角,从平板的另一端开始平行密集划线,直至划满平板的剩余部???。置37℃温箱培养。
;②分区划线法
右手将接种环按无菌操作法沾取少许培养物(金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌等),左手拿平板略打开,将标本涂于平板表面的一侧边缘,运用腕力连续划线(要密但不要重叠,不要划破培养基),划线范围约占平板面积的1/4。将平板旋转约90°,接种环经灭菌、冷却后,通过第一次划线区2~3次。再作同样划线又占平板面积约1/4。重复上述操作,划完整个平板。将平板放在37℃温箱内,18~24小时后观察各区细菌生长情况,有无单个菌落,以及菌落的颜色、形态等。比较金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等的菌落特点。
;平板划线接种;第二次划线区;;;(3)半固体接种法 ;半固体培养基:;;(四)微生物的分布检测(学生操作);(四)微生物的分布检测(学生操作);(四)微生物的分布检测(学生操作);(四)微生物的分布检测(学生操作);(四)微生物的分布检测(学生操作);(四)微生物的分布检测(学生操作); 高压蒸汽灭菌器;三、作业
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