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灭菌与除菌;本章主要内容 ;第一节 染菌的危害;第二节 灭菌和除菌的基本原理;第一节 灭菌和除菌的基本原理;第一节 灭菌和除菌的基本原理;灭菌和除菌的基本原理;*;二、高温湿热灭菌
高温湿热灭菌是利用饱和蒸汽直接接触需要灭菌的物品以杀死微生物。
湿热灭菌法是目前最常用的基本灭菌方法,一般的湿热灭菌条件为121℃ (表压约0.1MPa) ,维持20~30min 。;湿热灭菌优点:
①蒸汽来源方便,操作简单,价格低廉,本身无毒;
②蒸汽有强的穿透力(能杀死耐热的芽孢杆菌)和很大的潜热,灭菌效果可靠;
因此被广泛用于工业生产。;*;能够杀死微生物的温度称为致死温度。;在致死温度下杀死全部微生物所需要的时间称为致死时间。
不同的微生物的致死温度和致死时间也有差别。
一般无芽孢的营养菌体在60℃保温l0min即可全部被杀死,而芽孢在100%下保温数十分钟乃至数小时才能被杀死,某些嗜热细菌在121℃下可耐受20-30min 。;*;灭菌方式;三、干热灭菌
是指在干燥高温条件下,微生物细胞内的各种与温度有关的氧化反应速度迅速增加,使微生物的致死率迅速增高的过程。
常用灭菌条件:160℃下保温1~2 h。;四、辐射灭菌
辐射灭菌是利用高能量的电磁辐射和微粒辐射来杀灭微生物。 α射线、X射线、β射线、γ射线、紫外线、超声波等从理论上讲都能破坏蛋白质,破坏生物活性物质,从而起到杀菌作用。
X射线的穿透力极强,但不经济,并且向四面八方辐射,不适于发酵生产使用。; 紫外线波长为2100~3100?的紫外线有灭菌作用,最常用的波长2537?的紫外线。
主要是与菌体核酸发生光化学反应而造成菌体死亡。
紫外线对微生物菌体和芽胞均有杀灭作用,有高度致死效果。但紫外线的穿透力很低,仅适用于表面和局部空间灭菌,如台面、洁净室、更衣室等。
现在,紫外线常与HVAC相结合用于气相循环消毒。
HVAC是Heating, Ventilation and Air Conditioning 的英文缩写,就是空气调节系统,是包含温度、湿度、空气清净度以及空气循环的控制系统。
;五、化学物质灭菌
原理:某些化学药剂能与微生物细胞中的某种成分产生化学反应,如使蛋白质变性、酶类失活、破坏细胞膜透性而具有杀菌或消毒的作用。
常用的化学药剂:甲醛、氯(或次氯酸钠)、高锰酸钾、环氧乙烷、苯酚、季氨盐(如新洁尔灭)、氯化汞等。
适用情况:①培养基里含有蛋白质等营养物质亦易与上述化学物质发生化学反应,
②同时药物加入培养基之后很难除掉。
适合于局部空间或某些器具的消毒,但不适合用于培养基的灭菌。;;*;优点: 阻力小,约0.01MPa;
除水、除油的效果好
耗电少,每处理1000m3的空气每小时仅耗电0.2~0.8KW。
缺点:
静电除菌效果不是很高,一般在85~99%之间。;七、臭氧(O3)灭菌
臭氧是一种强氧化剂,灭菌过程属生物化学氧化反应。原理是:
臭氧在常温、常压下分子结构不稳定,很快自行分解成氧气(O2)和单个氧原子(O);后者具有极强的氧化作用,能氧化分解细菌内部氧化葡萄糖所必须的酶,从而破坏其细胞膜,将它杀死;
直接与细菌、病毒作用,破坏它们的细胞器和DNA、RNA,使细菌的新陈代谢受阻,导致细菌死亡;
作用于细胞外膜的脂蛋白和内部的脂多糖,使细菌发生通透性畸变而溶解死亡。; 我国在GMP验证过程中人们大力推荐臭氧灭菌方法。臭氧灭菌有许多特点:
O3为气体,能迅速弥漫到整个灭菌空间,灭菌无死角,浓度分布均匀。
臭氧灭菌为溶菌级方法,杀菌彻底。杀菌能力与过氧乙酸相当,高于其它消毒剂。
杀菌广谱,可杀灭细菌繁殖体和芽孢、病毒、真菌等, 并可破坏肉毒杆菌毒素。另外,O3对霉菌也有极强的杀灭作用。
臭氧制备是利用我们周围的大气制取(现有成型产品:臭氧发生器),现制现用,不需储藏设施,节省原料储储所需的占地面积。
臭氧分解形成的单个氧原子(O)则会自行重新结合成为普通氧分子(O2),不存在任何有毒残留物,没有二次污染,故称无污染消毒剂(绿色消毒剂)。
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臭氧灭菌在药品生产中具有广泛的用途。
①对管道容器的灭菌;
②与HVAC相结合,利用中央空调净化系统对洁净区的灭菌;
③对原辅助材料和工作器具的灭菌;
④对密闭空间的灭菌;
⑤对药厂用水的灭菌处理。;八、介质过滤除菌
工业上主要用于热敏性物质(氨水、丙醇等)和空气的除菌。
按过滤除菌机制不同而分为
;1、绝对过滤
绝对过滤最常用的过滤材料是微孔滤膜。选择孔径为0
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