《03-蛋白质的结构与功能》课件.pptVIP

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第二章 蛋白质与核酸的化学 第二节 蛋白质的结构与功能 一、蛋白质的基本结构 (一)肽与肽键 (二)蛋白质的一级结构 1.定义:蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序,也是蛋白质最基本的结构。 2.维持一级结构的主要化学键: 肽键,有些蛋白质还包括二硫键。 胰岛素由A、B两条多肽链组成,共有51个氨基酸残基。 蛋白质测序 弗·桑格,(Frederick Sanger,1918年8月13日-)是一位英国生物化学家,曾经在1958年及1980年两度获得诺贝尔化学奖,是第四位两度获得诺贝尔奖,以及唯一获得两次化学奖的人。 蛋白质数据库: 全世界均可以从蛋白质数据库中获取蛋白质的一级结构 3.意义: 蛋白质的一级结构由遗传信息所决定。 一级结构决定其高级结构 一级结构决定其生理功能 如:镰刀形红细胞性贫血症 二、蛋白质的空间结构 1. 定义:多肽链通过折叠、盘曲,使分子内各原子形成一定的空间排布及相互关系,称蛋白质的构象,即空间结构。 2. 维持力:氢键、盐键、疏水键、范德华力等非共价键和二硫键。这些统称为次级键或副键。 氢键 (一)蛋白质的二级结构 多肽链中主链盘曲折叠形成的空间结构,不涉及侧链部分的构象。 1.α-螺旋(α-helix) α-螺旋的结构特点如下: ①多肽链主链以肽键平面为单位,α碳原子为转折点按顺时针方向盘曲形成右手螺旋。 ②螺旋中每3.6个氨基酸残基上升一圈,螺距为0.54nm。 ③相邻两圈螺旋之间形成链内氢键 ④肽链中氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧。 2.β-折叠(β-pleated sheet) 多肽链主链以肽键平面为单位,折叠成锯齿状结构称为β-折叠。 3.β-转角(β-turn) 蛋白质分子中肽链出现180°的回折。 4.无规则卷曲(random coil) 部分肽链的构象没有规律性,肽链中肽键平面排列不规则。 稳定蛋白质二级结构的主要化学键 : 氢键 (二)蛋白质的三级结构 蛋白质的三级结构: 蛋白质的整条多肽链中全部氨基酸残的相对空间位置。 结构与功能的关系 一条多肽链的蛋白质具备三级结构后即具有生物学功能。 每种有功能的蛋白质都具有自己的三级结构 (三)蛋白质的四级结构 蛋白质的四级结构: 具有两条或两条以上具有独立结构的多肽链,通过非共价键相互组合而形成的空间结构。 亚基: 四级结构的蛋白质中每个具有独立三级结构的多肽链单位 亚基单独存在时没有活性。 如:过氧化氢酶有4个相同的亚基组成,血红蛋白由2个α亚基和2个β亚基组成。 三、蛋白质的结构与功能的关系 蛋白质的结构决定其性质,而它的性质又决定它的功能,结构与功能是密切相关的。 朊病毒 正常:3个α-螺旋 异常:转变成β-折叠 进一步诱导α-螺旋转变成β-折叠 一级结构没有改变,分子功能发生了改变。 第三节 蛋白质的理化性质和分类 一、蛋白质的理化性质 蛋白质分子两端有可以的游离氨基和羧基,另外侧链中还有一些解离基,这些基团可以进行酸性或碱性电离,使蛋白质分子呈现两性电离的性质。 一、蛋白质的理化性质 (一)两性电离和等电点 蛋白质分子两端有可以的游离氨基和羧基,另外侧链中还有一些解离基,这些基团可以进行酸性或碱性电离,使蛋白质分子呈现两性电离的性质。 电泳: 带电粒子在电场中向相反电极移动的现象 二、蛋白质的胶体性质 蛋白质分子量大,直径已达到胶粒1~100nm范围,具有胶体溶液的一般性质。 蛋白质表面的水化膜和同种电荷是使蛋白质水溶液稳定的两个因素,去除这两个稳定因素,蛋白质极易从溶液中沉淀析出。 图2- 12 蛋白质胶体颗粒的沉淀 透析: 蛋白质分子粘度大,扩散速度慢,不易透过半透膜,我们可以利用蛋白质的这一性质来分离提纯蛋白质,这种方法称为透析。 三、蛋白质的变性 蛋白质的变性: 在某些物理或化学因素作用下,维持蛋白质空间结构的次级键断裂,空间结构发生改变或破坏,从而导致其理化性质改变和生物活性丧失的现象。 图2-14 核糖核酸酶的变性与复性 四、蛋白质的沉淀 蛋白质沉淀: 蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象 引起蛋白质沉淀的主要方法有下述几种: (一)盐析 在蛋白质溶液中加入大量的中性盐,破坏蛋白质的胶体稳定性而使其沉淀 盐析沉淀的蛋白质仍保持蛋白质的活性。 (二)有机溶剂沉淀法 有机溶剂如酒精、甲醇、丙酮等,能破坏蛋白质颗粒的水化膜,在等电点时使蛋白质沉淀。 在常温下,有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性,例如酒精消毒灭菌就是如此。 在低温条件下(0~4℃),变性进行较缓慢,可用于分离制备各种血浆蛋白质。

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