第三章-抗体工程制药.pptVIP

（2）洗脱 （3）扩增富集 （4）筛选效率的检测 （5）克隆的鉴定 2.酵母双杂交技术 细胞起始基因转录需要有反式转录激活因子的参与； 转录激活因子在结构上相互独立的结构域； DNA结合结构域(DNA binding domain, DB)和转录激活结构域(activation domain, AD), 不同转录激活因子的DB和AD形成的杂合蛋白仍 然具有正常的激活转录的功能。 (1)原理 被激活的转录因子一般采用报告基因。 检测报告基因可知道融合蛋白是否表达，并 进一步研究两融合蛋白的关系。 单独的DB虽然能和启动子结合, 但是不能激 活转录。 His, β-gal His, β-gal （2）酵母双杂交的组成 BD融合蛋白表达载体，是已知蛋白，称诱饵 蛋白。 AD融合蛋白表达载体，是待筛选的蛋白，称 为靶蛋白，或猎物。 有一个或多个报告基因的宿主菌株。 （3）应用 A 、检验一对功能已知蛋白间的相互作用； B 、研究一对蛋白间发生相互作用的结构域； C 、用已知功能的蛋白筛选双杂交cDNA文库； D 、分析新基因的生物学功能。 第八节 抗体药物 一、概述 异源性蛋白引起的较强的人体免疫反应限制了这类药物的应用，因而逐渐被抗生素类药物所代替。 第一代抗体是指多克隆抗体药物 1890年Behring等人发现白喉抗毒素，并建立了血清疗法，开抗体制药之先河。 1937年Tiselius