第五章-基因工程研究生09.pptVIP

科学出版社案例式教材《生物化学》课件 基因工程（genetic engineering）是人们在对自然界基因重组和基因转移的认识上发展起来的一门分子生物学技术。 基因工程的重要特点是在分子水平上操作，细胞水平上表达。 它的诞生和发展，不但为生命科学的理论研究提供了崭新的技术手段，而且为医学领域的发展开辟了广阔的前景。 第一节 基因工程的基本原理 第二节 基因工程的物质基础 一、工具酶 （一）限制性核酸内切酶 （二）DNA聚合酶 (三) DNA连接酶 (四) 其它DNA修饰酶 （一）限制性核酸内切酶 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出 来的。限制性核酸内切酶分为三类，在基因 工程操作中所说的限制酶，通常指Ⅱ类限制 性核酸内切酶。 限制酶的性质和作用特点 限制酶识别序列的长度一般为4-6个核苷酸。 切割DNA分子中的磷酸二酯键，产生5′-P、3′- OH的DNA片段。 限制酶切割DNA分子形成黏性末端(sticky end) 和平末端或钝末端(blunt end)两种 。 5′…CTGCA G…3′ PstⅠ识别序列 3′…G ACGTC…5′ 形成3′-OH黏性末端 5′…G AATTC…3′ EcoRⅠ识别序列 3′…CTTAA