荧光染料的选择.PDF

——期待您的发现 徕卡显微系统 生命科学部 李国庆 博士 Section 1 • 共聚焦及双光子基础 • 双光子技术应用 显微镜成像： 显微镜是把很小的对象放大,使得能看见的工具 把小细节看清楚的３个先决条件： 1. 放大：把小物像放大 2. 分辨率：能分辨两点之间的最小距离 3. 反差：辨认已经被放大和具有一定分辨率的细节 只有具备了上述３个条件，才尽可能真实地把物体信息转化为物体图像 Magnification Resolution Human eye 1x 0.2 mm Magnifier 10x 0.02 mm Stereomicroscope 100x 2 m Compound microscope 1000x 0.2 m Electron microscope 1 Mio. x 0.2 nm 另外，可以在物镜前端和 数值孔径：N.A. 盖玻片之间加入浸液来提 – 一个由物镜（聚光镜）覆盖的固定角度量度。 高分辨率。 分辨率： 数值孔径越大，物镜分辨率越高 荧光原理 FITC Rhod merged FITC / Rhod bovine endothelial cells 激发光波段控制 荧光显微镜基本配置 光学显微镜分类 视网膜 • 光学显微镜有正置和倒置显微镜 （这两者也合称复合式－ Compound microscopes) ，以 及体视显微镜。 肉眼瞳孔 • 光学显微镜分宽视场显微镜和共 目镜筒和目镜 聚焦 （激光扫描）显微镜两大类 显微镜机身 物镜 载物台，上面放置样品 聚光镜，孔径光阑 光源聚光镜和视场光阑 光源，灯丝 普通荧光显微镜与激光共聚焦显微镜的区别 Laser ，Pinhole ，PMT Mercury Lamp Laser Pinhole