毕业论文设计《Cementprotein的转化表达优化与纯化》.docVIP

江苏农林职业技术学院毕业论文（设计） Cenment protein的转化表达优化与纯化 江苏农林职业技术学院 毕 业 设 计（论 文） Cement protein的转化表达优化与纯化 专 业 生物技术及应用（生物制品） 学生姓名 班 级 07生物技术及应用（生物制品） 学 号 0702091104 指导教师 完成日期 2010.04.20 毕业设计（论文）任务书 姓名 　 学号 0702091104　 班级 07生物技术及应用 题目 Cement protein的转化表达优化与纯化 设计(论文)主要内容 1:Cement protein的基因构建与优化。 2:Cement protein的E.coli表达 4:Cement protein的纯化 重点研究问题 1: Cement protein的基因构建与优化使之能与NI柱亲和。 2: Cement protein的E.coli表达最佳化表达。 4: Cement protein的纯化与试剂的透析去除。 主要技术指标 1: Cement protein的质粒转入BL-21。 2: Cement protein在E.coli中的表达量。 3:融合蛋白的纯化的纯度与浓度。 4:融合蛋白中残留试剂去除。 补充 1: Cement protein基因导入质粒不能破坏原有质粒中有效基因片段。 2:质粒中His标签的添加不能破坏原有质粒中有效基因和Cement protein的基因。 4:融合蛋白的试剂去除是通过透析去除，有微量实验试剂存在。 指导老师意见 指导教师签字： 年 月 日 指导教师意见 对论文的简短评价： 1.指出论文存在的问题及错误 2.对创造性工作评价 3.建议成绩 优 良 中 及格 不及格 指导教师签字 年 月 日 评阅教师意见 对论文的简短评价： 1.指出论文存在的问题及错误 2.对创造性工作评价 3.建议成绩 优 良 中 及格 不及格 评阅教师签字 年 月 日 江苏农林职业技术学院毕业论文（设计） 江苏农林职业技术学院毕业论文（设计） 2 1 答辩小组评议意见 学号　 0702091104　　姓名 陈忠德 题目 Cement protein的转化表达优化与纯化 　答辩小组意见： 1、对论文的评价 2.建议成绩等级 优 良 中 及格 不及格 3.需要说明的问题 答辩小组长签字 年 月 日 Cement protein的转化表达优化与纯化 摘要:本实验将含有Cement protein基因片段的重组载体pCold TF转化入E.coli BL21(DE3)中, 在摇瓶培养的条件下，细胞中融合蛋白的含量达到60%以上；然后利用包涵体处理、复性、Ni-IDA亲和层析的方法纯化蛋白。使用2.4L的菌液，经诱导、纯化、复性后大约可以得到10mg的蛋白；同时采用ELISA检测法，证实了纯化的SPG有很高的活性。 关键词：融合蛋白的表达；Ni-IDA亲和层析。 Abstract: In this study, containing Cement protein fragment pCold TF recombinant vector was transformed into E.coli BL21 (DE3), in shake flask culture conditions, cell prot