生化实验一--果蔬中维生素C的定量测定课件.pptVIP

生物化学实验 第一部分 果蔬成分的生化分析 综合实验一： 果蔬成分的生化分析 实验一 果蔬中维生素C的定量测定（4学时） 实验二 果蔬中总糖及还原糖含量的测定（4学时） 实验三 果蔬中蛋白质含量的测定（4学时） 实验四 果蔬中过氧化物酶分析（12学时） 实验材料： 冬枣＋柚子——1～4组 梨（2个品种）——5～8组 盘菜＋萝卜 ——9～12组 实 验 一 果蔬中维生素C的定量测定 一、目的 1、掌握微量测定维生素C的方法和技术。 2、了解果蔬中维生素C含量。 三、实验器材 1、微量滴定管及架 2、台秤 3、50mL量筒 4、1mL、10mL吸管 5、100mL锥形瓶 6、剪刀 7、滤纸 8、新鲜果蔬 四、实验试剂 1、1%草酸溶液：1000mL 2、2%草酸溶液：2000mL 3、维生素C标准液：100mL 准确称取50.0mg维生素C溶于1%草酸溶液中，稀释至500mL刻度处（即1mL溶液中含有0.1mg维生素C），储存于棕色瓶中，最好用时配制。 4、氧化型0.1%2，6-二氯酚靛酚溶液：500mL 准确称500mg氧化型2，6-二氯酚靛酚溶于200mL含有104mg NaHCO3的热水中，冷却后加水稀释至500mL刻度处，摇匀过滤，滤液储于棕色瓶置冰箱中冷藏。临用时以标准VC溶液标定。 五、操作 1、制备新鲜果蔬液：洗净新鲜果蔬，擦干表面水分，剥去外皮，称20g果蔬，放入50mL量筒中，加2%草酸液至40mL刻度处，研磨成匀浆。用玻棒搅拌，静置10分钟，过滤，滤液即是。 2、染料液装入滴定管中：应驱除滴定管中的气泡，调整好零点。 3、滴定维生素C标准液：吸取1.0mL维生素C标准液放入锥形瓶中，加9mL1%草酸溶液，摇匀，用染料液滴定至微红色保持15秒不褪色即为终点。记下所用去染料液数量，可算出1mL染料相当于多少毫克维生素C。 4、滴定样品液：吸取10.0mL样品液放入锥形瓶中，同上操作进行滴定。可做两份，求平均值。 为了结果准确，滴定要快，可尽量减少其他还原型物质的干扰。滴定用去的染料液应在1～4mL范围内，为此可适当调节样品液稀释倍数。