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高通量建库测序数据拆分质控.pdf
高通量建库测序+数据拆分
姓名:王彬安
时间:2017年06月15日
文库构建(~ 6 hrs)
DNA
Cluster簇生成(~ 5 hrs) cBot
HiSeq xTen
MiSeq
SBS测序 HiSeq
MiSeq
数据分析
bcl2fastq
文库构建流程 片段化DNA
末端补平
3’加A
接头连接
PCR
Index Sequencing 此单链部分与
高质量DNA文库结构 Primer FlowCell表面上P7接
头相同
此单链部分与
FlowCell表面上P5接
头相同 文库构建的目的是在目的DNA片段两端都连接上想要
的接头
HiSeq测序用到的引物
Multiplexing Read 1 Sequencing Primer
5 ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT
Multiplexing Index Read Sequencing Primer
5 GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCAC
Multiplexing Read 2 Sequencing Primer
5 GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCT
FlowCell上的接头
P7接头序列
5’ sttttttttttcaagcagaagacggcatacga 3’
S
R
F P5接头序列
C OH
aatgatacggcgaccaccga 3’
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