《生物技术制药第三章基因工程制药》课件.ppt

4.产生杂合抗生素 不同抗生素合成基因重组；生物合成途径中某个酶基因的突变；在生物合成途径中引入一个酶基因；利用底物特异性不强的酶催化形成新产物 七、基因工程在氨基酸和维生素生产中的应用 1.在氨基酸生产中的应用 发酵法生产的氨基酸是菌体的一系列酶作用的初级代谢产物。克隆某些酶系基因，在大肠杆菌中进行表达2.在维生素生产中的应用 构建制造VitC的基因工程菌，使生产工艺大大简化 八、基因工程在生物制品制造中的应用 应用基因工程技术研制新型疫苗的重点是 1.用常规方法难于培养的病原体 2.有潜在致癌或免疫病理作用的病原体 3.免疫效果不好或安全性差的常规疫苗 4.为降低成本，简化免疫程序而制备的多价活疫苗 九、基因工程在新药研究中的应用 利用基因工程技术筛选新药的原理：先从与人类疾病产生的生化过程研究中找出致病的关键基因、酶或受体，接着利用基因工程技术大量生产这种关键酶和关键受体 谢谢使用！ 发酵液 细胞分离 胞内产物 胞外产物 细胞破碎 固液分离 包含体 细胞碎片分离 变性 复性 浓缩 初步纯化 高度纯化 制剂 成品 四、分离纯化技术 分离纯化技术应满足的要求：①技术条件要温和 ②选择性好 ③收率要高 ④各种技术能直接衔接 ⑤整个分离纯化过程要快 （一）细胞破碎 1.细胞收集：常用离心分离法，也可用膜过滤法 2.细胞破碎 高速匀浆法：高速剪切及高压挤压 超声破碎法：超声波的声能作功 机械破碎法 高速珠磨法：类似球磨机原理 高压挤压法：先冷却至-25~-30℃，再用500MPa以 破碎方法 上的高压冲击，挤出高压阀孔而压破 酶溶法 非机械破碎法 化学渗透法 热处理法 渗透压冲击法 （二）固液分离 高速离心 离心沉淀法 超速离心 微滤：分离细胞、细胞碎片、包含体、蛋白质沉淀等固体颗粒 膜 过 滤 超滤：用于浓缩蛋白质、多糖、核酸等大分子物质 反渗透：脱去抗生素、氨基酸等小分子中的水分 双水相分配法：水溶性高聚物-无机盐组成双水相系统（如PEG-无机盐） 将混合物与双水相混合，离心分相，则PEG、目的物和杂蛋 白富集在上相，而细胞碎片、核酸、多糖等分布于下相 （三）目的产物的分离纯化 常用的分离纯化方法是色谱法，其优点有： ①分离机制多种多样，可供选择