【细胞生物学】内膜系统与蛋白质分选和膜运输1.pptVIP

* 线粒体内/外膜蛋白的转运 （单个前导肽，停止转运序列） 与Tim（内膜转运酶）结合就成为内膜蛋白 与Tom（外膜转运酶）结合就成为外膜蛋白 * 线粒体膜间隙蛋白的转运 （单个前导肽，停止转运序列） 糙面内质网的功能--信号肽与蛋白质运输 ?信号序列(signal sequence) ◆研究过程 ●1960s ,George Palade 示踪技术研究培养细胞的蛋白合成分泌过程 ●Redman和Sabatini用分离的RER小泡研究膜结合核糖体合成的蛋白质去向 ●1971年美国洛克菲勒大学的Blobel等提出了信号序列(signal sequence)的概念。 同位素示踪实验 A.无微粒体 B.加微粒体 蛋白质入RER实验 无微粒体体系合成蛋白 ◆信号肽的证实 G.Blobel等用核糖体、微粒体无细胞蛋白合成体系进行离体实验证实了信号肽的存在: ●RER小泡对产物的影响 ●蛋白水解酶实验 ●多聚核糖体的离体翻译 * RER小泡实验 蛋白水解酶水解实验 多聚核糖体离体 翻译实验 ?信号肽的特性 ◆序列特征 15-35个氨基酸残基，1个或多个带正电氨基酸，其中含有4-12个疏水残基。 ◆信号序列无特异性: ◆位置: ●N-端信号肽 ●内部信号肽 ?早期信号假说(signal hypothesis) 1975年，Blobel等正式提出了信号假说: